Fkbp11转基因小鼠的建立

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:joyuan100
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Fkbpll是用基因芯片对小鼠肝细胞癌组织中差异表达基因进行筛选过程中获得的一个功能未知基因,属于Fk506结合蛋白家族成员,具有一个保守的肽基辅氨酸异构酶(peptidyl-prolyl cis/trans。isomerases,PPIase)结构域,主要在腺体组织中高表达,前期的体外实验提示Fkbpll可能通过影响细胞周期参与肿瘤的发生过程。 为在体内研究Fkbpll的生物学功能,本实验以pIRES2-EGFP质粒为骨架载体,构建了一个由CMV启动子驱动表达的Fkbpll真核表达载体,通过雄原核显微注射的方法建立了该基因的转基因小鼠。用PCR和Southern杂交的方法共检测出2只阳性转基因小鼠。用Northern杂交、Western印记和荧光显微镜观察进行检测,其中一只首建者小鼠P803的子代表达谱稳定,Fkbpll基因表达于小鼠的胰腺、胃脏、心脏和肾脏组织,其中,胰腺组织的腺泡表达水平最高。表型分析显示Fkbpll转基因小鼠在胰腺、胃脏和肾脏有不同程度的病理改变。而另外一只首建者小鼠P423小鼠仅在少量胰腺腺泡中有外源性基因的表达,子代小鼠表型不明确。 通过本研究获得了能够有效表达Fkbpll且传代稳定的转基因小鼠,Fkbpll转基因小鼠在多个组织表达外源性基因,该转基因小鼠的建立为Fkbpll的功能研究提供了良好的动物模型。
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