【摘 要】
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目的研究大鼠急性出血坏死型胰腺炎模型中小肠粘膜p-STAT3及其调控的Bcl-2、Bax蛋白的表达、肠上皮细胞氧化应激水平及其凋亡情况、肠粘膜通透性改变等指标间的关系;探讨肠上
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目的研究大鼠急性出血坏死型胰腺炎模型中小肠粘膜p-STAT3及其调控的Bcl-2、Bax蛋白的表达、肠上皮细胞氧化应激水平及其凋亡情况、肠粘膜通透性改变等指标间的关系;探讨肠上皮细胞氧化应激时,STAT3在其凋亡和通透性改变中的作用;进一步应用酪氨酸激酶抑制剂AG490阻断JAK2/STAT3信号传导通路,观察对氧化应激时肠上皮细胞的凋亡和通透性的影响.方法(1)应用不同分组的大鼠急性出血坏死型胰腺炎(Acute NecrotizingPancreatitis,ANP)模型,测定血浆D-乳酸含量反映肠粘膜通透性、测定肠粘膜黄嘌呤氧化酶(XO)活力和丙二醛(MDA)含量反映肠上皮氧化应激水平、肠粘膜TUNEL染色和DNA琼脂糖凝胶电泳反映肠上皮细胞的凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色反映肠上皮细胞的增殖情况、固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测小肠粘膜p-STAT3、Bax、Bcl-2蛋白表达量,应用SPSS11.0统计学软件分析各指标与胰腺炎严重程度、各检测指标间的相关性,了解p-STAT3的表达与胰腺炎肠粘膜屏障损伤的关系;(2)应用细胞培养、Western blot、MTT法、流式细胞术、跨上皮细胞电阻检测等方法,观察氧化应激对肠上皮细胞p-STAT3、Bax、Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡、单层细胞和通透性的影响;(3)应用细胞培养、Western blot、RT-PCR、MTT法、流式细胞术、跨上皮细胞电阻检测等方法,观察AG490对氧化应激时肠上皮单层细胞上述各项指标的影响.
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