【摘 要】
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红霉素抗性基因ermE编码了一种甲基化酶,可以对50S核糖体亚基上的23SrRNA进行甲基化修饰,甲基化作用可能引起核糖体构型变化,阻碍红霉素与50S核糖体亚基的结合,从而使宿主获得抗
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红霉素抗性基因ermE编码了一种甲基化酶,可以对50S核糖体亚基上的23SrRNA进行甲基化修饰,甲基化作用可能引起核糖体构型变化,阻碍红霉素与50S核糖体亚基的结合,从而使宿主获得抗性。本研究将来自红色糖多孢菌(Saccharopolysporaerythraea)的ermE基因克隆到链霉菌高拷贝表达载体pUWL201和pIJ6021上,使ermE基因分别位于组成型启动子ermEp*和硫链丝菌素诱导型启动子PtipA的下游,成功构建出了链霉菌表达质粒pKIM4、pKIM7和pKIM8。将pKIM4,pKIM7和pKIM8分别转入S.lividans链霉菌中,每种转化子都能表现出明显的红霉素抗性,并且ermE基因在pKIM8/TK64转化子中还实现了高效表达。此外,本研究还对红色糖多孢菌原生质体的再生率进行了优化,所获得的最高再生率为6.4%,为后续的工作创造了良好的条件。
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