果胶酶产生菌HDYM-02的诱变育种

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果胶酶是一类分解果胶质的酶的总称,是含有多种组分的复合酶。果胶酶广泛分布于高等植物和微生物中,在某些原生动物和昆虫中也有发现。在微生物中,细菌、放线菌、酵母和霉菌都能代谢合成果胶酶。果胶酶在工业生产领域中是一种重要的新兴酶类。据统计,目前果胶酶在全世界食品酶的销售额中占25%。 本文以黑龙江巴彦亚麻有限公司沤麻池中分离筛选出的HDYM-02为出发菌株,先用紫外线进行诱变,从大量突变株中进行筛选,选育出4株产果胶酶性质稳定且酶活明显提高的突变株:U6,U12,U27,U36,其中的U12在6h时的酶活为出发菌株的1.44倍。将U12作为亚硝基胍诱变出发菌株,经过4轮诱变,筛选出突变株4株:N4,N15,N33,N52。其中N33在24h时的酶活为85.39μmol/mL。将N33进行紫外和亚硝基胍复合诱变,得到突变株4株:F6,F18,F22,F35其中F22在24h时的酶活达到98.33μmol/mL。最后将F22进行紫外和硫酸二乙酯符合诱变,得到本研究的最终突变株F’14,其在24h时的酶活为111.27μmol/mL,是出发菌株产量(34.39μmol/mL)的3.2倍将最终突变株F’14转接10代,用DNS法测其发酵液的吸光值,测定结果显示UN37发酵液的吸光值比较稳定,说明果胶酶产量稳定没有出现回复突变,并且较出发菌株的吸光值有很大提高。
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