论文部分内容阅读
泛素-蛋白酶体系统负责体内蛋白质的选择性降解。由泛素-蛋白酶体系统降解的蛋白质在包括炎症反应、细胞周期调控和基因表达的多种细胞进程中起着关键作用。马达蛋白质是由一种利用化学能进行机械运动的生物大分子复合物，它们在生物体内参与了胞质运输、DNA复制、细胞分裂、肌肉收缩等一系列重要生命活动。细胞内的马达蛋白质包括肌球蛋白(myosin)、驱动蛋白(kinesin)、DNA解旋酶(：DNA helicase)和F1-ATP酶等。我的工作主要研究泛素-蛋白酶体系统如何调控马达蛋白质降解并最终控制细胞动力学的。
着丝粒相关蛋白质E(CENP-E)是一个驱动蛋白相关的微管马达蛋白质，它在有丝分裂期对于染色体凝聚有着重要作用，它可以将纺锤体微管和有丝分裂检验点的信号联系起来。然而CENP-E在中间体的功能仍然未知。在我第一部分的工作中，我们发现Skp1可以在体内和体外结合CENP-E，并在有丝分裂的末期和CENP-E共定位于中间体。进一步研究发现Skp1促进中间体定位CENP-E的降解，而CENP-E在中间体上的降解对于调控胞质分裂十分重要。我们因此推测CENP-E的降解对于细胞有丝分裂的正常完成有关键作用，而CENP-E是通过Skp1实现被泛素-蛋白酶体系统水解的。
动力蛋白激活蛋白dynactin和动力蛋白dynein是细胞内负责膜泡的运输以及有丝分裂纺锤体组装的马达蛋白质。p150是dynactin中最大和最重要的亚基，在结合dynein以及微管过程中起着重要的作用。F-box蛋白质家族的蛋白作为参与组成泛素-蛋白质连接酶，即SCF(SKP1-cullin-F-box)复合物的四个亚基之一，在SCF复合物介导的泛素修饰及蛋白质降解中起重要调控作用。我的第二部分工作发现并鉴定了F-box蛋白质FBXL5结合p150并且通过泛素一蛋白酶体系统调控p150的降解。FBXL5和p150在体内和体外均能结合，它们还在HeLa细胞的细胞质中共定位。FBXL5的过表达会促进p150的多泛素化修饰，并且加速p150的降解。这一研究发现为阐明p150蛋白质代谢提供了一个可能的分子调控机制。