目的：　　世界范围的器官极度短缺已经成为制约器官移植发展的主要问题，由于移植技术和器官保存技术的提高，心死亡供者(donors of cardiac death，DCD)逐渐成为重要移植器官来源。20世纪80年代后欧美多家移植中心重新关注DCD以拓宽移植供者来源，为DCD器官移植揭开了新的篇章。近30年来，欧美的众多移植中心、学术团体和科研机构致力于让DCD更科学规范地为临床服务。　　而与DBD比较，DCD必须坚持到无心肺功能并宣布死亡之后才开始进行器官获取过程，供者器官经历了较长的热缺血时间。器官获取时段的组织缺氧、酸中毒、细胞间稳态的破坏、炎性通路的大量激活成为DCD与DBD最大的区别。　　热缺血时间应指心脏停搏至低温灌注开始前的一段时间。澳大利亚＼新西兰则要求肝移植WIT≤30分钟;荷兰要求WIT在150分钟内;英国视热缺血时间为收缩压小于55mmHg至低温灌注开始的一段时间，要求肝移植WIT≤20分钟;此外，冷缺血时间(cold ischemia time，CIT)应保持在最低水平，一般来说6-8小时内可获得较好的移植效果。有研究显示:在肝移植中，热缺血时间超过55分钟，受者死亡风险增加2倍，而冷缺血时间超过10小时，则显著增加死亡风险。　　器官保存是器官移植的三大技术支柱之一。为了提高患者长期存活率、缓解供器官短缺的矛盾，移植临床对器官保存技术提出了更高的要求。UW液(University of Wisconsin solution)是目前移植中器官保存液的“金标准”，临床应用近20年，能够有效保存肝脏、胰腺、肾脏。UW液含有非渗透性物质包括乳糖酸、木棉糖、羟乙基淀粉，能够抑制低温保存期间细胞水肿，含有谷胱甘肽和腺苷，有助于提高移植物抵抗缺血/再灌注损伤的能力并维持细胞能量代谢。　　然而，与DBD相比，DCD导致移植器官功能延迟(delayed graft function，DGF)，甚至原发性移植器官无功能(primary non function，PNF)的发生率明显提高，使得我们有必要去寻找一个新的器官保存方法。下一代器官保存技术将需要满足两大挑战，以减少损伤的器官支持检索和移植之间并提供一种可靠的方法的可行性测试适合于临床应用。低温有氧灌注保存(hypothermic oxygenatedperfusion，HOPE)是符合上述的方法之一，本文就DCD小型猪肝脏低温灌注保存的应用及原理进行进一步的探讨。　　方法：　　1、本DCD猪实验模型属于M-Ⅲ范畴，根据国外相关文献报道，诱导实验动物DCD死亡有数种常用方法:窒息、放血、电击等。因“窒息”法具有相对安全，可控性强等优点，根据美国密歇根大学医学院Obeid NR等提出的方案，本实验尝试建立小型猪DCD模型，并为进一步建立DCD猪器官灌注模型提供基础。　　2、本实验用Lifeport机为中国医科大学器官移植实验室新近采购，曾用于低温条件下人肾脏机械灌注。本实验根据Jain S等和Shigeta T等实验参数，利用2台lifeport机通过改良构建DCD猪肝脏低温机械灌注系统。观察，比较机械有氧灌注和传统冷保存后的肝脏形态学和功能方面的变化。并且利用微量透析仪检查肝组织内代谢性生化指标的变化。　　结果：　　1、本研究成功地创建了DCD小型猪模型。通过窒息法，创建模型过程顺利。是一种可行的方法。同时发现，麻醉的深浅程度对模型的建立影响巨大，要尽量做到标化。同时观察到热缺血时间30分钟，肝脏已经达到了废弃的边缘，热缺血时限与澳大利亚等国的标准相符合。　　2、本实验利用2台Lifeport机通过改良构建了猪DCD供肝低温有氧机械灌注系统。本灌注系统具有压力控制，温度控制，参数实时连续监测，集成自动除泡功能，脉冲式灌注等优点。比较机械有氧灌注和传统冷保存后的肝脏形态学和功能方面的变化;利用微量透析仪检查肝组织内代谢性生化指标的变化，均得出了机械有氧灌注要明显好于传统冷保存的结论。　　3、利用微量透析仪，我们了解到一部分肝组织内代谢指标的变化。　　结论：　　1、本实验利用2台Lifeport机通过改良成功构建了猪DCD供肝低温有氧机械灌注系统。　　2、对于猪DCD供肝，机械有氧灌注要好于传统冷保存。　　3、HOPE组较SCS组保持了较高水平的能量代谢:HOPE组肝组织液内葡萄糖保持了较低的水平，灌注后期，SCS组明显高于HOPE组;HOPE组肝组织内乳酸水平明显低于SCS组乳酸水平;HOPE组丙酮酸水平逐渐降低，灌注中后期，HOPE组肝组织液内丙酮酸水平明显低于SCS组丙酮酸水平。