【摘 要】
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目的1、探讨通过完全损伤黑质建立帕金森病(PD)异动症动物模型的可行性。2、研究舟山眼镜蛇毒CTXn对PD动物模型的治疗效果。方法1、分别运用大剂量和中剂量6-OHDA建立黑质完
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目的1、探讨通过完全损伤黑质建立帕金森病(PD)异动症动物模型的可行性。2、研究舟山眼镜蛇毒CTXn对PD动物模型的治疗效果。方法1、分别运用大剂量和中剂量6-OHDA建立黑质完全损伤和部分损伤的动物模型;以转棒试验(Rota Rod Test)和圆筒试验(Cylinder Test)评估模型大鼠运动功能;运用异常不自主运动(AIM)评分方法评估左旋多巴(L-DOPA)诱导的模型大鼠的异动行为;通过免疫组织化学染色检测模型大鼠的黑质TH阳性细胞;运用高效液相检测模型大鼠的纹状体多巴胺含量。2、通过大剂量6-OHDA完全损伤黑质建立PD异动症模型,运用CTXn(安慰剂对照用生理盐水)进行预处理,然后运用转棒试验评测大鼠运动协调能力,运用L-DOPA诱导大鼠发生的异常不自主运动(AIM)行为。3、通过中剂量6-OHDA部分损伤黑质建立PD模型,运用尼古丁或/和CTXn进行预处理,然后运用转棒试验评测模型大鼠的运动协调能力、运用APO诱导模型大鼠发生旋转行为。4、通过中剂量6-OHDA部分损伤黑质建立PD模型,运用CTXn(安慰剂对照组用生理盐水)连续腹腔注射2周,然后运用转棒试验评测模型大鼠的运动协调能力、运用APO诱导模型大鼠发生旋转行为,再行免疫组化染色观察纹状体ChAT阳性细胞、多巴胺D2受体阳性细胞和黑质TH阳性细胞数量。结果1、大剂量6-OHDA建立黑质完全损伤动物模型的成功率为71%,死亡率为7%。2、黑质完全损伤大鼠模型在Rota Rod试验转棒上的滞留时间为假手术对照组的55.3%;在圆筒试验中损伤侧前肢触壁次数占双侧触壁总数的比例为19.6%;在首次给予L-DOPA或APO诱导下,均可表现出AIM行为,AIM评分随L-DOPA剂量的增加而上升;损伤侧黑质TH阳性细胞丢失达98%以上,其纹状体内多巴胺DA的含量为对侧的0.94%。3、对于异动症大鼠模型,CTXn降低了L-DOPA诱导的各项AIM行为评分,同时,CTXn急性干预对正常大鼠和异动症模型均没有明显降低其运动能力。4、对于PD大鼠模型,尼古丁显著降低了模型大鼠运动协调能力,而CTXn不影响尼古丁的作用; CTXn急性干预降低了模型大鼠运动协调能力、减少了APO诱导的旋转行为;CTXn慢性干预2周后模型大鼠的运动协调能力有所改善; CTXn慢性干预2周后,损伤侧纹状体区多巴胺D2受体阳性细胞的表达明显增加,而黑质TH阳性细胞数、纹状体ChAT阳性细胞数无明显变化。结论1、通过大剂量6-OHDA完全损伤黑质可以建立PD异动症模型,长期L-DOPA波动刺激并非产生异动症的必要条件。2、舟山眼镜蛇毒素CTXn可以改善PD异动症动物模型的AIM行为。3、CTXn可以增加PD动物模型损伤侧纹状体内多巴胺D2受体的表达。
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