菌株WX-10海藻糖合成酶的研究

来源 :无锡轻工业大学 江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenpeng12333
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土壤菌WX-10初步证明具有催化淀粉合成海藻糖的酶系-麦芽寡糖基海藻糖生成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶.该论文以该菌为基础,对其进行了遥瓶培养,培养条件优化和酶反应条件优化等方面的研究.得到了较优条件如下:培养基组成及发酵条件-蔗糖2%,NaCl12.5%,牛肉膏0.05%,装液量50ml/500ml三角瓶,pH7.5,30℃,旋转式遥床220rpm,72hr.酶反应条件-反应底物为浓度12.5%,DE值15ˉ20的淀粉液化液.反应缓冲液为50mM,pH6.5的磷酸缓冲液.反应温度为34℃,反应时间为2hr.优化后,产物转化率是优化前的8.235倍.对该菌酶反应条件部分试验结果进行分析,初步推断该菌所产麦芽寡糖基海藻糖水解酶的活力很低.产物海藻糖的定性,定量测定采用TLC和HPLC分析方法.该论文着重研究了HPLC在海藻糖定量上的应用,最终确定其最佳操作条件为:APS柱,柱长20cm,流动相为78%乙腈水溶液,流速为1ml/min,检测系统为示差折光检测器,进样量为5μl.
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