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目的：探索EGF诱导NSCLC细胞SPC-A1分泌炎症因子IL-8及其可能的分子通道。方法：使用EGF (0.01 ug/ml,0.1μg/ml和1ug/ml)处理人NSCLC细胞24小时,ELISA法测上清中的IL-8蛋白浓度。之后采用EGF(100ng/ml)单独和分别联合EGFR-Tki(厄洛替尼10μM,1μM),PI3K抑制剂GDC-0941和BEZ-235(1μM和100nM),以及ERK1/2的抑制剂PD98059(10μM和1μM)处理SPC-A1细胞系24小时,测上清中的IL-8浓度。最后,采用EGF(100ng/ml)单独和联合新的PI3K抑制剂SHBM1009 (10,6,3, 1μM)作用于SPC-A1细胞,测12小时,24小时,48小时上清中的IL－8浓度。所有实验设立空白对照组。结果：EGF刺激SPC-A1细胞系24小时,上清中的IL-8显著升高,并呈EGF浓度依赖趋势。对照组上清中的IL-8浓度为(43.07±12.26pg/ml),而EGF(10ng,100ng和1ug/ml)刺激组的上清中IL-8水平分别为(103.68±11/36,216.91±8.07和232.21±42.44pg/m1),p值分别为(p<0.01,p<0.001和p<0.001)。EGF(100ng/m1)单独及联合各抑制剂作用于SPC-Al细胞24小时后的ELISA结果显示,EGFR-Tki (10μM和1μM), GDC-0941, BEZ-235 (1μM)和PD98059(10μM)均可有效抑制EGF诱导的IL-8分泌,p值分别为p<0.01或p<0.05(与EGF刺激组比较)。最后,各浓度的SHBM1009 (10,6,3,亦可抑制EGF诱导的IL－8分泌。结论：证实了EGF可刺激SPC-A1肺癌细胞自身可分泌趋化因子IL-8。而EGF可诱导NSCLC细胞系SPC-A1分泌IL-8,这可能是通过EGF/EGFR/PI3K/ERK1/2通道实现的。目的：观察EGF单独及联合各抑制剂(EGFR-Tki,GDC-0941,BEZ-235,SHBM1009和PD98059)刺激SPC-A1细胞后细胞生物学活性的变化,并证实EGF刺激SPC-A1细胞后对其下游PI3K和ERK1/2的激活作用。方法：MTT实验：采用EGF(100ng/ml)单独及联合4个浓度(10nM, 100nM,1μM和10gM)的5种抑制剂EGFR-Tki,PI3K抑制剂GDC-0941、BEZ-235、SHBM1009和ERK1/2的抑制剂PD98059处理SPC-A1细胞24小时,采用MTT方法检测细胞存活数。Cell-IQ细胞动态观测系统：采用EGF(100ng/ml)单独及联合数个浓度的各抑制剂作用于SPC-A1细胞72小时,动态观测细胞的生物学活性(细胞总数,分裂细胞数,细胞活动度)Western-blot:采用EGF100ng/ml单独及联合各抑制剂作用于SPC-A1细胞后,western-blot方法检测各组细胞内蛋白pAkt, Akt, pERK和ERK的水平。结果：MTT结果显示：与EGF单独刺激组相比,PD98059和GDC-0941(10μM)仅能抑制约10%的细胞生长(p<0.05)。而EGFR-Tki(厄洛替尼10μM)能抑制约25%的细胞生长(p<0.01)。BEZ-235可抑制细胞生长约30%-40%(p<0.01)。SHBM1009的抑制作用最强,根据浓度的不同(0.1－1.0和10μM)可抑制约25-35%到60%的细胞生长(p<0.01)。Cell-IQ实时细胞监测系统中,EGF可改变SPC-A1细胞的生物学活性：促进SPC-A1细胞的增值,使细胞分裂相的细胞增加,并使细胞活动加快。而EGF的这些作用也可以为上述5种抑制剂所抑制。EGF刺激SPC-A1细胞后,可使细胞内的pAkt和pERK1/2蛋白水平升高。而EGFR-Tki可完全抑制这一作用。PI3K抑制剂可抑制EGF诱导的pAkt升高,ERK1/2抑制剂可抑制EGF诱导的pERK1/2蛋白升高。结论：EGF可改变SPC-A1的生物学表现,促进其增值,分裂加速,活动加快。而这是通过EGFR/PI3K/Akt/ERK1/2通道实现的。