玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)又称F-2毒素,由镰刀菌产生的类雌性真菌毒素,对人和动物具有毒害作用,广泛存在于粮食和畜牧饲料中,是世界范围内粮食和饲料的主要污染物之一。动物食用被玉米赤霉烯酮污染的饲料后,可能会引起机体生殖系统、免疫系统、内分泌系统损害,导致“高雌激素综合症”和致癌危害,给养殖业造成不容忽视的影响。现已有研究表明,动物摄入玉米赤霉烯酮后,主要代谢场所在肝脏和小肠,其代谢产物主要有α-玉米赤霉烯醇和β-玉米赤霉烯醇。目的:国内外对玉米赤霉烯酮在谷物中的检测进行了众多的研究报道,但对于动物机体被玉米赤霉烯酮侵染后,玉米赤霉烯酮及其代谢产物在动物机体内的毒代动力学研究相对较少,在血液中的含量变化规律更少,而在国内对血液中玉米赤霉烯酮的研究几乎没有。本文拟深入研究玉米赤霉烯酮及其代谢产物在三黄鸡体内的毒代动力学,优化血浆中玉米赤霉烯酮及其代谢产物的前处理方法和检测方法,从而分析玉米赤霉烯酮(ZEA)、α-玉米赤霉烯醇(α-ZOL)和β-玉米赤霉烯醇(β-ZOL)在血浆中的变化规律,丰富玉米赤霉烯酮的毒代动力学数据。方法:建立同时测定ZEA、α-ZOL和β-ZOL的高效液相色谱法。血浆通过乙酸乙酯两次液-液萃取,氮气流干燥,流动相复苏。用Agilent ZORBAX SB-Aq(4.6×250mm)色谱柱分离,乙腈/水(45/55,v/v)为流动相等度洗脱,流速为1mL·min-1,平衡至18min,PAD检测波长 ZEA 和 α-ZOL 为 236nm,β-ZOL 为 238nm,以 ZEA、α-ZOL和β-ZOL峰面积定量。18只三黄鸡随机分为两组,一组12只用于口服(po)给药,一组6只用于静脉(iv)给药,均给剂量为1.2mg/kg BW的ZEA,通过翅静脉固定留置针在给药前、给药后第5、10、15、20、30、50、70、100、140 min和第 3、4、6、7、9、12、16、20、24、36 h时间点采血,分离血浆。测定血液中三种物质随时间发生变化的数据,用药动学软件分析获得药动学参数。结果:本试验研究了 ZEA及其代谢产物的毒代动力学,优化了血浆中ZEA、α-ZOL和β-ZOL的提取方法,建立了简洁高效的HPLC检测法,其ZEA、α-ZOL和β-ZOL的检测限(LOD)分别为1.60±0.86 ng/mL、1.28±0.64ng/mL 和 1.11±0.73 ng/mL,回收率分别为88.94%～92.08%、93.52%～98.50%、88.60%～94.67%。三黄鸡口服和静注1.2 mg/kg BW的ZEA后,房室模型分析表明,ZEA、α-ZOL和β-ZOL均符合二房室模型。采用Kinetical 4.4药代动力学分析软件处理数据,药动学参数显示,口服给药后,ZEA在10min内就代谢为α-ZOL和β-ZOL,二者含量相差不大。ZEA在0.5 h达到最高血药浓度64.32±5.49 ng/mL,3h 后含量低于检测限;α-ZOL 和 β-ZOL 均在 0.8 h左右出现最大血药浓度,总体α-ZOL含量比β-ZOL高,分别在6 h和7h后降至不可检测的水平。ZEA的T1/2α为0.201±0.465h,在0.452±0.034 h 时即达到 Cmax为 62.757±10.121 μg/mL,其 T1/2β 为1.593±0.847h,AUC为81.115±7.427h·μg/mL,CL为12.896±2.013 mL/h/kg,其生物利用度为48.32%;α-ZOL在0.754±0.016h即达到Cmax为42.833±6.619ng/mL,CL为10.419±7.004mL/h/kg;β-ZOL 在1.008±0.077 h 即达到 Cmax 为 22.917±4.729 ng/mL,CL 为 10.419±7.004 mL/h/kg。静注给药后,ZEA、α-ZOL和β-ZOL含量随时间快速下降,ZEA在2.3 h,α-ZOL和β-ZOL在4 h后含量降至检测限后不能被检出。ZEA、α-ZOL 和 β-ZOL 的 T1/2α 分别为 0.095±0.041 h、0.162±0.134 h和 0.114±0.013h,T1/2β分别为 0.828±0.019h、1.215±2.816h和3.324±0.259 h,CL为9.729±2.030mL/h/kg、10.173±0.086 mL/h/kg和11.394±1.758mL/h/kg,Vd 为 10.571±8.125、14.796±0.598 和66.502±26.357 L/kg。结论:本研究成功建立了同时检测鸡血液中玉米赤霉烯酮及两种重要代谢物的高效液相色谱方法,具有处理简便、快速准确的特点。ZEA口服后快速进入血液中迅速代谢为α-ZOL和β-ZOL,代谢物在血液中清除较快,组织穿透性强,体内分布广泛,可能存在组织蓄积。