论文部分内容阅读
现代研究表明,许多中药具有免疫增强作用,可以通过促进免疫器官发育,提高细胞免疫、体液免疫水平,增强红细胞免疫功能,促进吞噬细胞吞噬功能等途径发挥免疫增强作用。鉴于目前许多免疫增强剂的免疫效果不够理想,中药免疫增强剂有广阔的应用前景。本研究选择具有免疫增强功能的中药黄芪、党参和白花蛇舌草按不同比例组成9个复方,首先通过体外试验筛选出增强免疫作用最好的处方,再通过体内试验测定筛选出的方剂对小鼠脾淋巴细胞增殖、血清IL-2、IFN-γ、IgG和IgM含量、腹腔巨噬细胞功能的影响,对雏鸡外周血T淋巴细胞转化、血清IL-2和IFN-γ含量、ND-HI抗体效价和免疫器官指数的影响,以及对雏鸡的安全性。旨在为研制中药免疫增强剂提供理论依据。本研究分为以下4部分：试验1.复方中药的体外筛选试验用MTT法测定了由黄芪、党参、白花蛇舌草组成的9个复方中药在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果表明,它们促进淋巴细胞增殖强弱顺序为方2>方3>方7>方1、方4、方5、方6、方8、方9,方2的作用最好,可以作为中药免疫增强剂的候选方。试验2.复方中药对小鼠免疫功能的影响64只小鼠分为4个组,2个试验组分别灌服高、低剂量的2号复方中药合剂,单味药对照组灌服黄芪多糖,空白对照组灌服生理盐水,每天1次,连用10 d,检测小鼠脾淋巴细胞增殖和血清中IgG、IgM、IL-2、IFN-γ的含量、腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数的变化。结果表明,复方中药能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖、提高血清中IgG、IgM、IL-2、IFN-γ的含量和腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数,尤以高剂量组的效果显著；复方的作用显著优于黄芪多糖。试验3.复方中药对雏鸡免疫功能的影响8日龄广西黄土公鸡150羽随机均分为5组,复方中药的高、中、低剂量组分别按8、4、2 g／kg bw灌服复方中药,黄芪对照组按8 g／kgbw灌服黄芪多糖,空白对照组灌服等量生理盐水,1次／天,连服10d。9日龄时免疫新城疫疫苗,23日龄二免。分别于二免后第7、14、21、28 d时采血,用MTT法检测外周血T淋巴细胞转化,用Elisa试剂盒测定血清IL-2和IFN-γ含量,用血凝微量法测定血清新城疫抗体效价；分离法氏囊、胸腺和脾脏,测定免疫器官指数。结果表明,复方中药能显著促进雏鸡外周血T淋巴细胞转化,提高血清中IL-2、IFN-γ含量和ND-HI抗体效价,促进免疫器官发育,效果显著优于黄芪多糖。试验4.复方中药对雏鸡安全性试验8日龄广西黄土公鸡150羽随机均分为5组,复方中药的高、中、低剂量组分别按8、4、2g/kg bw灌服复方中药,黄芪对照组按8 g／kgbw灌服黄芪多糖,空白对照组灌服等量生理盐水,1次／d,连服10 d。9日龄时免疫新城疫疫苗,23日龄二免。分别于二免后第7、14、21和28 d时每组随机抽取5只,采血检测血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和尿酸(UA)、球蛋白(GLB)的含量。结果表明,复方中药在该剂量范围对雏鸡是安全的。