【摘 要】
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首先我们建立了大量血液标本HCV-RNA检测的RT-nPCR方法,内外两对引物序列采用HCV基因组中最为保守的5’-NCR区.为减少大量阳性标本之间的交叉污染,HCV-RNA的提取采用Roche公
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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首先我们建立了大量血液标本HCV-RNA检测的RT-nPCR方法,内外两对引物序列采用HCV基因组中最为保守的5’-NCR区.为减少大量阳性标本之间的交叉污染,HCV-RNA的提取采用Roche公司的病毒RNA提取试剂盒,并在检测系统中引入HCV-RNA的阴性、阳性、弱阳性对照,以判定每次实验是否成立.由于标本量大,我们将PCR循环中退火与延伸两步合并为一步,以缩短反应时间.同时对Chiron公司的RIBA和Genelabs公司的WB两种补充确认试剂做对比分析,选用了Chiron公司的RIBA用于该课题的抗体确认研究.通过该课题的研究,了解到献血人群中HCV感染者多是无症状携带者且抗体谱呈多样化分布,尤其是从确证单片段阳性血液中检出HCV-RNA.提示预防经血传播HCV血液筛查应从多方面考虑,HCV-Ab EIA检测应高度灵敏,报废血的产生是必然的.最后,为了能够更好的执行卫生部关于两次检测的血液筛查模式,我们依据第二部分对献血人群HCV感染者的感染状态的分析结果及参比血清盘制备的原则,建立了血站抗-HCV试剂质控品,用于血站选择对不同区抗体灵敏度互补的试剂、试剂研制及其他HCV的相关研究.
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