【摘 要】
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本论文共包括两部分实验内容:一部分是对青霉xfsf-8的固体发酵条件以及对青枯病菌的抗性试验进行了研究;另一部分是青霉xfsf-8固体发酵菌剂田间对烟草青枯病以及对烟草病毒病
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本论文共包括两部分实验内容:一部分是对青霉xfsf-8的固体发酵条件以及对青枯病菌的抗性试验进行了研究;另一部分是青霉xfsf-8固体发酵菌剂田间对烟草青枯病以及对烟草病毒病的防治研究。烟草青枯病和烟草花叶病是引起我国烟草疾病的两种主要病害。病毒病在我国烟田的发病率一般为5%-20%,重者大50%,发病后期烟株严重矮化,生长缓慢。烟草青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstoniasolanacearum),引起的细菌性病害,典型症状引起烟草叶片枯萎,特别是在烟草苗期常导致烟草幼苗成片枯萎,一旦发病就会造成全株死亡。通过固体发酵对培养基的种类和组成成分进行筛选,得到对病虫害具有显著防治效果的生防菌剂,在烟草青枯病和病毒病的防治上取得了较好的效果。青霉xfsf-8菌株是从烟田土壤中分离纯化出的一种真菌,平板抗性实验表现出对青枯雷尔氏菌较高的抗性。将青霉xfsf-8作为防治烟草青枯病的生物固体菌剂,通过单因素试验、Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验、Box-Behnken实验对青霉xfsf-8固体发酵产孢条件进行了优化。单因素实验结果显示,在所筛选的培养基成分中,碳源玉米粉、培养介质为蛭石、氮源硫酸铵、无机盐硫酸镁、生长因子酵母粉、接种量为1.2×106/ml、含水量40%、pH4、培养周期为8天、吐温-80含量1%在各自组内产生的孢子数最多。通过Plackett-Burman实验筛选出对青霉xfsf-8固体发酵产孢量影响显著的因素,结果显示,酵母粉、含水量、吐温-80为显著性影响因素。显著性影响因素确定后,针对酵母粉、吐温-80和含水量的质量浓度进行最陡爬坡实验,结果显示,酵母粉0.6%,含水量32.8%,吐温-80含量0.9%时孢子产量最高。以青霉xfsf-8固体发酵产孢量为主要目标,根据最陡爬坡实验确定响应面实验中心点进行响应面Box-Behnken实验,结果显示,酵母粉0.61%,含水量37.7%,吐温-80含量0.8%时青霉xfsf-8固体发酵产孢量最大。最终得到培养基中各因素的最佳水平组合为碳源玉米粉0.5%、培养介质为蛭石、氮源硫酸铵0.5%、无机盐硫酸镁0.5%、生长因子酵母粉0.61%、接种量为1.2×106/ml、含水量37.7%、pH4、培养周期为8天、吐温-80含量0.8%。通过开展不同药剂对烟草青枯病的田间试验,结果显示,青霉xfsf-8菌剂对烟草青枯病的防治效果显著,防效为87.15%,显著降低了烟草青枯病的发病率和病情指数,其效果优于硫酸链霉素。通过开展不同药剂对烟草病毒病的田间试验,结果显示,青霉xfsf-8菌剂对烟草病毒病的防治效果显著,防效达到55.06%,显著降低了烟草病毒病的发病率和病情指数,其效果优于盐酸吗啉胍。
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