【摘 要】
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从中国西藏、内蒙古地区天然碱湖中分离的225株嗜碱菌中筛选到一株高产胞外碱性弹性蛋白酶(Alkalineelastase)的菌株XE22-4-1.结合16SrRNA序列同源性分析和形成、生理生化特
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从中国西藏、内蒙古地区天然碱湖中分离的225株嗜碱菌中筛选到一株高产胞外碱性弹性蛋白酶(Alkalineelastase)的菌株XE22-4-1.结合16SrRNA序列同源性分析和形成、生理生化特性,该菌株被暂鉴定为BacilluspseudofirmusXE22-4-1.嗜碱牙孢杆菌XE22-4-1产生的碱性弹性蛋白酶为胞外酶,其发酵液经离心、硫氨分级沉淀和亲和层析等纯化步骤,得到了比活力高达4659u/mL的酶蛋白,收率为51.2﹪.该酶蛋白经SDS-PAGE电泳呈两条带(30,000dalton和18,000dalton),其中较小的条带为该酶的自裂解产物.该酶的最适反应温度和最适反应pH分别为55℃和pH9.0,在45℃以下和pH6-11之间稳定性良好,Zn<2+>、Cu<2+>、Hg<2+>、Ag<2+>严重抑制酶的活性.NBS、PMSF和EDTA完全抑制酶的活性,表明此酶的活性中心应含有丝氨酸和色氨酸,且酶活性需要一定浓度的金属离子存在.另外,该酶与其它来源酶的显著区别在于,该酶对SDS有一定的耐受能力,暗示该酶可能具有比较特殊的三级结构.
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