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目的:通过体外培养哺乳期乳腺细胞,观察不同碘营养水平时哺乳期乳腺细胞钠碘转运体(NIS)表达的变化,及促甲状腺激素(TSH)、催乳素(PRL)、雌二醇(E2)对不同碘营养水平下哺乳期乳腺细胞钠碘转运体(NIS)表达的影响。
方法:培养小鼠原代哺乳期乳腺细胞,分为低碘1组、低碘2组、适碘组、高碘1组、高碘2组,研究其NIS表达的变化;再分别加入TSH、PRL、E2,比较不同因素对哺乳期乳腺细胞NIS表达的影响。用实时荧光定量PCR方法检测哺乳期乳腺细胞NIS mRNA表达,并用Western blot方法检测蛋白表达。
结果:1、低碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平高于适碘组,差异具有统计学意义(P<0.01);高碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平略低于适碘组,但差异没有统计学意义。随着碘浓度升高,除高碘2组外,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈下降趋势。2、除碘加TSH低碘1组乳腺细胞NIS mRNA表达水平显著高于单纯加碘的低碘1组外(P<0.01),其余各组比较差异均没有统计学意义。碘加TSH后,低碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平高于适碘组,差异均具有统计学意义(P<0.05);高碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平低于适碘组,差异有统计学意义(P<0.05);随着碘浓度升高,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈下降趋势。3、碘加PRL的低碘1组、适碘组、高碘1组乳腺细胞NIS mRNA表达水平高于单纯加碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);碘加PRL后,低碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平高于适碘组,差异均具有统计学意义(P<0.05);高碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平低于适碘组,差异有统计学意义(P<0.01);随着碘浓度升高,乳腺细胞NIS mRNA表达水平呈下降趋势。4、除高碘2组外,碘加E2各组乳腺细胞NIS mRNA表达水平均高于单纯加碘各组,差异有统计学意义(P<0.05)。碘加E2后,低碘组乳腺细胞NIS mRNA表达水平高于适碘组,差异均具有统计学意义(P<0.05);高碘2组乳腺细胞NIS mRNA表达水平碘高于适碘组,差异有统计学意义(P<0.05),但高碘1组没有差异。5、低碘1组乳腺细胞NIS蛋白表达水平高于适碘组,差异具有统计学意义(P<0.05)。高碘组乳腺细胞NIS蛋白表达水平有低于适碘组的趋势,但差异没有统计学意义(P>0.05)。随着碘浓度升高,乳腺细胞NIS蛋白表达水平呈下降趋势。6、碘加TSH各组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平均高于单纯加碘的各组,差异有统计学意义(P<0.05)。碘加TSH后,低碘组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平高于适碘组,差异有统计学意义(P<0.01);高碘组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平有低于适碘组的趋势,但差异比较没有统计学意义(P>0.05)。7、碘加PRL低碘组、适碘组乳腺细胞NIS蛋白表达水平均高于单纯加碘的各组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。加PRL后,低碘1组乳腺细胞NIS蛋白表达水平高于适碘组,差异均具有统计学意义(P<0.01);高碘组乳腺细胞NIS蛋白表达水平低于适碘组,差异有统计学意义(P<0.01)。8、碘加E2低碘、适碘组的乳腺细胞NIS蛋白表达水平均高于单纯加碘组,差异均具有统计学意义(P<0.01),但高碘组相比没有统计学意义。加E2后,低碘组乳腺细胞NIS蛋白表达水平高于适碘组,差异均具有统计学意义(P<0.05);高碘组乳腺细胞NIS蛋白表达水平低于适碘组。
结论:1、从不同碘营养水平时哺乳期乳腺细胞摄碘能力影响的研究结果来看,母体存在减轻子代碘缺乏或碘过量的保护机制。在缺碘条件下,母体提高乳腺摄碘能力,减轻碘缺乏对子代造成的危害;在高碘条件下,母体降低乳腺摄碘能力,减轻碘过量对子代造成的危害。2、在低碘和适碘水平下,TSH、E2、PRL对哺乳期乳腺细胞NIS mRNA和蛋白表达表现为上调作用,使碘在乳汁中聚集,以减轻碘缺乏对子代的影响,其中以雌二醇上调作用最显著。3、在高碘时,TSH对哺乳期乳腺细胞NIS mRNA和蛋白表达依然表现为上调作用,而E2和PRL在重度高碘时表现为抑制作用,从而减少乳汁中的碘。