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目的:建立骨癌痛模型,观察鞘内注射星形胶质细胞抑制剂氟代柠檬酸作用,及对脊髓背角NMDA受体亚型和GFAP表达的影响。
方法:建立小鼠股骨癌痛实验模型,分别鞘内注射(IT)fluorocitrate(0.25nmo1/5 μ L、0.50nmo1/5 μ L、0.75nmol/5 μ L)和MK-801(2.5nmol/5 μ L、5.Onmo1/5 u L、10.0nmol/5 μ L),术后第10天给药,每天一次,连续五天;同时分别采用von—Frey filaments机械刺激法和热辐射刺激法评定大鼠机械刺激缩足反射阈值(Paw withdrawal mecthanical threshold,PWMT)热刺激缩足反射潜伏期(Paw withdrawal thermal latency,PWTL);术后第10天开始,每天一次,持续到术后第21天,术后第16天分别运用免疫组织化学法、免疫荧光法、免疫印迹法观察脊髓背角NMDA受体亚型及GFAP蛋白表达变化。
结果:骨肿瘤种植后,骨癌组同侧后足机械缩足反射阈值和热缩足反射潜伏期均明显降低,与假手术组相比,差异均具有显著性(P<0.01);骨癌痛小鼠鞘内注射不同剂量FC和MK-801后,其MWT和TWL均显著增加,与对照组相比,差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01),但其效应持续时间不同,剂量越大持续时间越长。鞘内注射FC后,三个剂量组的NR.1蛋白含量与对照组相比均显著升高(P<0.05或P<0.01),NR2B蛋白含量却是降低(P<0.05或P<0.01),NR2A没有明显变化(P>0.05)。鞘内注射MK-801后,与对照组(脊髓背角的星形胶质细胞数量增多,胞体显著增生肥大,突起减少)相比,三个剂量组星形胶质细胞数量明显减少,胞体细小,突起增多, 5nmol组、10nmol组表现更为明显。
结论:1、脊髓背角星形胶质细胞与NMDA受体参与小鼠骨癌痛的病理过程。2、鞘内注射fluorocitratet和MK-801能减轻甚至完全逆转骨癌痛小鼠的机械和热痛觉过敏。