【摘 要】
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目的 探究人乳头瘤病毒(HPV)编码的早期癌蛋白E6、E7对小GTP酶蛋白Rab12表达的影响.方法 利用逆转录病毒包装系统获得含pBabe-Vector质粒和pBabe-HPV16E7质粒的高滴度病毒颗
【机 构】
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山东大学齐鲁医学院病原生物学系;山东大学齐鲁医学院癌症研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81571986)
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目的 探究人乳头瘤病毒(HPV)编码的早期癌蛋白E6、E7对小GTP酶蛋白Rab12表达的影响.方法 利用逆转录病毒包装系统获得含pBabe-Vector质粒和pBabe-HPV16E7质粒的高滴度病毒颗粒,感染细胞,并用嘌呤霉素筛选获得稳定表达HPV16E7的UMSCC10A-16E7细胞系,Western blotting检测E7相关蛋白E7、pRb、p53、E2F1的表达变化,比较UMSCC10A-Vector细胞系和UMSCC10A-16E7细胞系的Rab12蛋白表达水平.用同样方法在HaCaT、RPE1细胞系中进一步验证.用siRNA干扰SiHa、Caski细胞(HPV-16阳性的宫颈癌细胞)中16E6/E7及HeLa细胞(HPV-18阳性的宫颈癌细胞)中18E6/E7的表达,通过Western blotting比较siRNA干扰前后E6、E7相关蛋白E2F1、p53和Rab12蛋白的表达差异.结果 利用逆转录病毒包装系统成功构建稳定表达的细胞系,过表达E6、E7的细胞系中Rab12表达升高,干扰E6、E7的细胞系中Rab12的表达降低.结论 HPV编码的早期癌蛋白E6、E7可调控Rab12的表达.
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