PFN2在胃癌组织中的表达水平、临床意义及对胃癌细胞功能影响

来源 :皖南医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyuan1984
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目的:研究PFN2在胃癌组织中的表达水平、临床意义及对胃癌细胞功能影响,作为胃癌早期诊断生物学标志物、预后评价指标及治疗靶点提供理论依据。方法:采用组织芯片技术和IHC法检测100例胃癌组织及其癌旁组织中PFN2蛋白表达水平;通过Western Blot验证PFN2在胃癌组织中表达水平;通过分析PFN2蛋白表达与胃癌患者临床数据以及预后,发现它们之间相关性;体外培养人胃癌MKN-45细胞,将PFN2 si RNA与NC si RNA分别转染至MKN-45细胞PFN2-si RNA组和control-si RNA组,使用Western Blot验证si RNA转染后对细胞中PFN2表达的干扰效果,再通过Transwell实验、CCK-8实验来对比成功转染si RNA的两组MKN-45细胞的侵袭能力及增值能力;体外培养人胃癌MKN-45细胞,将PFN2 vector与NC vector别分转染至MKN-45细胞PFN2-vector组和control-vector组,使用Western Blot验证vector转染后PFN2过表达效果,再选取Transwell实验、CCK-8实验对比成功转染vector的两组MKN-45细胞的侵袭能力及增值能力。结果:1.组织芯片中可见PFN2蛋白表达的结构保存完好,位点共180个。部分位点无法判读,包括6例胃癌组织和5例癌旁组织。在可以判读的位点中,94例胃癌组织中,PFN2蛋白表达水平最低评分1.00,最高评分15.00,平均5.8830;75例癌旁组织中,PFN2蛋白表达水平最低评分1.00,最高评分8.75,平均4.8767。两者对比,在胃癌组织中PFN2蛋白表达水平高于癌旁组织表达水平(P<0.01),差异有明显的统计学意义。2.通过Western Blot方法检测PFN2蛋白在5对癌组织与癌旁组织中表达水平,显示癌组织PFN2蛋白表达高于癌旁组织(P<0.05),差异有统计学意义。3.在PFN2蛋白表达与患者临床数据分析中发现,通过检测组织样本中PFN2与常见癌相关抗体ki67、p53、VEGFR、CD133的相关性,数据处理显示在胃癌患者组织中,PFN2表达和VEGFR表达呈正相关关系(P<0.01),差异有显著的统计学意义;患者生存数据分析中,发现胃癌及癌旁组织中PFN2蛋白高表达的患者的预后显著更差(P<0.01);癌组织中PFN2蛋白表达水平的分组以及胃癌的临床病理分级均是胃癌病人的重要的独立预测因子(P<0.05),差异有统计学意义。4.在si RNA转染PFN2蛋白表达敲低组中,Transwell侵袭实验结果显示,PFN2-si RNA组较control-si RNA组侵袭能力显著降低(P<0.01),差异有统计学意义;在CCK-8增值实验中,显示PFN2-si RNA组相较control-si RNA组侵袭能力显著降低(P<0.01),差异有统计学意义。而在vector转染PFN2蛋白过表达组中,Transwell侵袭实验结果显示,PFN2-si RNA组相较control-vector组侵袭能力显著增强(P<0.01),差异有统计学意义;在CCK-8增值实验中,显示PFN2-vector组较control-vector组增值能力显著增强(P<0.01),差异有统计学意义。结论:1.PFN2蛋白在胃癌组织中高表达,可作为胃癌诊断标志;2.PFN2蛋白在高表达患者预后更差,可作为胃癌预后的评价指标;3.PFN2蛋白促进人胃癌MKN-45细胞的增殖、侵袭。
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