海参(Colochirus robustus)是属于棘皮动物门(Echinodermata)海参纲(Holothuroidea)楯手目(Aspidochirotida)的一种海洋动物,在我国作为名贵的食品和药材已有几千年的历史。海参多肽(Sea cucumber peptides,SCP)是以新鲜海参为原料,经过蛋白酶水解,分离纯化得到的具有生物学功能的小分子肽。研究表明海参多肽具有多种生理学功能,包括抗菌、抗氧化和抗炎等。然而,目前关于SCP免疫调节方面的研究较少,而且对SCP的免疫调节功能也没有进行全面系统的分析,更重要的是关于SCP如何调节免疫功能及其相关的作用机制仍然不清楚。因此,我们进行了如下研究:将C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(PBS),低剂量SCP组(25 mg/kg),中剂量SCP组(50 mg/kg),高剂量SCP组(75 mg/kg)。实验结果表明:灌胃8周后,SCP对C57BL/6小鼠的体重无显著影响,能上调脾细胞中T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞亚群百分比,血清ALB浓度也随SCP剂量依赖性增加,NK细胞杀伤K562肿瘤细胞的能力显著比对照组强。同时,我们发现一定剂量的SCP能增强CD3/CD28和ConA诱导的脾T淋巴细胞的增殖能力,以及LPS诱导的B淋巴细胞增殖的能力,但不是随着SCP剂量增加其促进作用也随之增强。此外,SCP能促进Th1型(IL-1β,IL-2,IFN-γ和TNF-α)和Th2型(IL-4,IL-6和IL-10)细胞因子的分泌。为了进一步研究SCP的作用机制,我们分析了SCP的有效成分,并将其水解为包含16种氨基酸的水溶液,这些水解氨基酸(HAA)被用作体外机制研究。结果发现SCP分子量分布于100~2000 Da之间,说明SCP含有丰富的小分子活性肽。而且,HAA能增强在CD3/CD28刺激下的淋巴细胞的增殖,并能促进IL-2、IL-6和IFN-γ细胞因子的分泌。更重要的是,HAA能促进TCR信号通路上的关键分子CD3ζ和ZAP-70的表达上调。综上所述,本研究从非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫等多个角度研究SCP对C57BL/6小鼠免疫功能的影响,并初步探讨其可能的免疫调节机制。我们的实验结果表明SCP主要通过活化CD3ζ和ZAP-70介导的TCR信号通路来增强小鼠的免疫功能。