油用牡丹组织培养与快繁技术研究

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以“凤丹”牡丹芽和种子等外植体为实验材料,对其消毒、褐化防治、增殖诱导、生根等问题的进行了研究。实验结果如下:1.当选用“凤丹”牡丹鳞芽作为外植体材料时,用75%酒精消毒30S和0.1%升汞消毒8min效果较好;当选用“凤丹”牡丹种子作为外植体材料时,用75%酒精消毒50s,或是用0.1%次氯酸钠消毒5分钟的效果较好。2.“凤丹”牡丹鳞芽外植体的褐化发生主要集中在接种后的一周左右。培养基中添加3 mg/ml的硝酸银,并结合低温弱光培养可有效缓解牡丹褐化现象。3.初代诱导最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,鳞芽培养7天后的就开始萌动,诱导率可达到82.32%;继代增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+PIC(毒莠定,Picloram)1.0 mg/L;生根最佳培养基为1/2MS+CaCl2 220mg/L+IBA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。4.2.0 mg/L GA3+0.1 mg/L NAA对牡丹种胚诱导生长效果较好,子叶展开和胚根长成时间明显提前,种胚生长正常。5.选用不同浓度6-BA和NAA组合培养基对“凤丹”牡丹的三种外植体进行愈伤诱导,种胚愈伤诱导效果较好,茎段和叶片次之,3.0 mg/L 6-BA+0.6 mg/L NAA较适合种胚愈伤的诱导,可以诱导出胚性愈伤;6选用不同浓度6-BA和2,4-D组合培养基对“凤丹”牡丹的三种外植体的进行愈伤诱导,种胚、茎段、叶片的愈伤诱导率差异性不大,当6-BA为3.0 mg/L和2,4-D为1.5mg/L时,三者愈伤诱导率分别为93.14%、81.57%、79.40%,但形成的愈伤多为白色疏松的团状组织,培养后期均没出现分化现象。
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