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目的:探索培养液中TGF-β1浓度与原代胃粘膜成纤维细胞发生转化之间的关系;研究不同TNM分期的胃癌组织及血清中TGF-β1表达情况及其意义。方法:(1)原代培养HGMF,流式细胞学方法检测细胞Desmin、Vimentin、TSP-1、FAP-a、Collagen III及Collagen I表达情况。分别调整培养液TGF-β1浓度为5、10、15pg/ml,收集不同代数的细胞进行检测:透射电镜检测细胞超微结构,计数法测定细胞生长曲线,BSA法检测细胞总蛋白含量。(2)免疫组织化学SP法检测分析40例胃癌石蜡切片组织中TGF-β1的表达;ELISA法检测上述病例患者血清中TGF-β1的表达量。结果:(1)原代分离的HGMF表达Desmin阴性、Vimentin阳性、TSP-1阴性、FAP-a阴性、Collagen III阳性、Collagen I阳性;B2、B3、C2、C3四组细胞电镜下可见胞浆内线粒体肿胀、增多,有形态学上的改变。第8代细胞比较无明显差异。第12代细胞比较,C2生长速度明显比B2及P2快(P<0.01),而B2与P2比较两者无显著差异。第16代细胞比较,C3、B3生长速度明显比及P3快(P<0.01),而C3与B3比较两者无显著差异。1×10~6个第12代细胞B2、C2、P2蛋白含量分别为0.3747±0.0308mg/ml、0.5292±0.0407mg/ml和0.3697±0.0476mg/ml(B2与C2比较,P=0.000;B2与P2比较,P=0.833;C2与P2比较,P值=0.000)。1×10~6个第16代细胞B3、C3、P3蛋白含量分别为0.5323±0.0413mg/ml、0.5415±0.0482mg/ml和0.3704±0.0421mg/ml(B3与P3比较,P=0.000;C3与P3比较,P=0.000;B3与C3比较,P值=0.723)。(2)有无淋巴结转移病例中组织TGF-β1阳性率分别为85%和45%(P=0.008);有无远处转移病例中组织TGF-β1阳性率分别为100%和58.82%,(P=0.137);T1、T2、T3、T4病例中组织TGF-β1阳性率分别为25%、45.45%、88.24%和100%(P=0.000,合并T1T2/T3T4后进行两两比较);低分化、中分化、高分化病例中组织TGF-β1阳性率分别为86.36%、36.36%和42.86%(P=0.002,合并中高分化后与低分化进行两两比较)。有无淋巴结转移病例中血清TGF-β1含量(pg/ml)分别为17.15±5.82和10.81±4.34(P<0.01,t=4.22);有无远处转移病例中血清TGF-β1含量分别为24.44±3.64和12.43±4.50(P<0.01,t=6.172);T1、T2、T3、T4病例中血清TGF-β1含量分别为8.91±3.04、10.19±1.75、17.11±5.14和23.72±3.81(P<0.01,t=19.37);低分化、中分化、高分化病例中血清TGF-β1含量分别为17.62±5.85,11.11±3.51和8.47±2.39(P<0.01,t=12.521)。胃癌组织中TGF-β1阳性与血清TGF-β1升高有交互作用(P<0.01,t=7.094)。结论:培养液TGF-β1含量浓度为15pg/ml可使原代细胞在较少的代数发生转化(第12代)。胃癌伴淋巴结转移、远处转移、浸润深度越高、分化程度越低,组织中TGF-β1阳性率显著升高,血清TGF-β1含量明显增高。组织中及血清中TGF-β1表达上调均与胃癌的发生及生物学行为密切相关且有交互作用;TGF-β1的表达可作为临床判断胃癌临床分期和分化程度的重要参考指标。