趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1在成釉细胞瘤组织中的表达与意义

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目的:  成釉细胞瘤(Ameloblastomas,ABs)是发生于颌骨内的牙源性上皮来源的肿瘤,在国内其发生率约占牙源性肿瘤的60%。肿瘤内主要含有成釉器样结构,但是无釉质或其他牙体硬组织形成。大多数肿瘤发生于颌骨内,常导致颌骨的膨大和面部的变形。虽属于良性肿瘤,但其具有局部侵袭和易复发的生物学行为,少数病例发生恶变后可以导致区域性淋巴结、肺等远处脏器转移,甚至有发生骨转移的零星报道。WHO2005年新分类将ABs分为4种临床病理行为不同的变异型,包括:实性/多囊型、骨外/外周型、促结缔组织增生型和单囊型。这些亚型在患者年龄、部位、影像学表现以及临床预后等方面均存在差异,以往对于其治疗多采用刮除术,由于其复发机率较大,所以目前多以扩大切除术为主,但仍有小部分患者有复发倾向。成釉细胞瘤大多数来源于牙齿正常发育完成后残余的牙源性上皮剩余,少部分来自口腔黏膜上皮基底细胞、含牙囊肿、始基囊肿和角化囊肿衬里上皮的演变。鉴于本病至今没有有效的治疗方法,因此研究其发病机制,寻找抑制肿瘤新的靶点,对预防和治疗本病有着较重要的意义。趋化因子基质细胞衍生因子-1(SDF-1)是CXC趋化因子家族的重要成员,其与特异性受体CXCR4结合后参与机体造血、干细胞生成、白细胞浸润、神经和心血管形成和HIV感染[1]等一系列生理病理过程。目前的许多文献报道证实了趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1在癌症中的进展或启动中都发挥着重要的作用。因此推测SDF-1/CXCR4可能与成釉细胞瘤的发生有一定的相关性。所以探讨趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1在成釉细胞瘤中蛋白和mRNA水平上的变化与成釉细胞瘤上述生物学行为到底存在着怎样的关联性是本实验的研究目的。  材料与方法:  80例成釉细胞瘤存档蜡块均来自2007年至2012年中国医科大学附属口腔医院病理科,新鲜手术标本-86℃冻存。诊断标准依据WHO2005年最新分类,以口腔鳞状细胞癌(OSCC),正常口腔黏膜(NOM)做对照,用免疫组织化学染色SP法观察SDF-1和CXCR4蛋白在ABs中的表达与分布情况。30例成釉细胞瘤新鲜手术标本均取自于中国医科大学附属口腔医院外科手术,用Western-blot法和逆转录Real-Time PCR法分别检测ABs中SDF-1和CXCR4蛋白的表达。  结果:  一、ABs中SDF-1免疫组化结果  SDF-1在ABs中大部分表达于胞质,偶见细胞核表达,以中度阳性强阳性为主,细胞质阳性为85%(68/80),正常黏膜上皮细胞无表达,在口腔鳞状细胞癌(OSCC)呈阳性表达。  二、ABs中SDF-1蛋白表达结果  用Western-blot方法,以GAPDH做内参,检测了30例ABs中SDF-1表达情况。结果显示,SDF-1在ABs(0.72±0.14)中的表达明显高于正常黏膜(0.48±0.04)中的表达,具有统计学意义(P<0.05),但在ABs和口腔鳞状细胞癌(OSCC)(0.83±0.09)组织中的表达无明显差别(P>0.05)。  三、ABs中SDF-1基因Real-Time PCR表达结果  用RT-PCR方法,以GAPDH作内参,检测了30例ABs中SDF-1的mRNA表达情况。结果显示30例ABs中有20例SDF-1在ABs中的表达相对于正常黏膜组织高4.06倍,但相对于口腔鳞癌组织要低2.25倍。  四、ABs中CXCR4免疫组化结果  CXCR4在ABs中有胞质的表达,并可见少量的细胞核表达,以中度阳性强阳性为主,胞质阳性为87.5%(70/80),正常口腔黏膜上皮细胞无表达,在口腔黏膜鳞状细胞癌(OSCC)呈阳性表达。  五、ABs中CXCR4蛋白表达结果  用Western-blot方法,以GAPDH做内参,检测了30例ABs中SDF-1表达情况。结果显示,CXCR4在ABs(0.72±0.12)中的表达明显高于正常黏膜(0.43±0.06)中的表达,具有统计学意义(P<0.05),但在ABs和口腔黏膜鳞状细胞癌(OSCC)(0.78±0.09)组织中的表达无明显差别(P>0.05)。  六、ABs中CXCR4基因Real-Time PCR表达结果  用RT-PCR方法,以GAPDH做内参,检测了30例ABs中CXCR4的mRNA表达情况。结果显示30例ABs中有21例SDF-1在ABs中的表达相对于正常黏膜组织高3.82倍,但相对于口腔鳞癌组织要低1.03倍。  结论:  ABs中SDF-1和CXCR4在mRNA水平和蛋白质水平上表达都上调,并且SDF-1和CXCR4均有胞浆及胞膜的表达,表明其与成釉细胞瘤的侵袭能力有一定关系。
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