目的：观察尿多酸肽(CDA-2)、亚砷酸、CDA-2与亚砷酸联合体外诱导慢性髓细胞白血病细胞(K562)株凋亡、抑制增殖的作用；探讨CDA-2与亚砷酸联合对诱导K562细胞凋亡及抑制增殖的协同作用，以及发挥协同作用的时间、单药浓度及强度，获得与单药相同作用时的联合用药的单药浓度，指导临床用药，减少不良反应，降低费用。　　慢性髓细胞白血病(CML)是一种起源于造血干细胞的恶性骨髓增殖性疾病，到目前为止仍然不可治愈。其发病机制为t(9；22)(q34；q11)突变，形成bcr/abl融合基因。进而编码bcr/abl融合蛋白(P210)，激活并增强酪氨酸激酶(PTK)活性，导致K562细胞凋亡受抑，白血病细胞在体内大量积聚。尽管各种酪氨酸激酶(PTK)抑制剂及造血干细胞移植提高了CML的治愈率以及生活质量，但广泛耐药及不良反应、增加的经济负担不可逾越。　　尿多酸肽(Uroacitides)，又称细胞分化剂-2(cell differentiation agent-2，CDA-2)，是含有有机酸、小分子多肽和氨基酸的混合物，经由健康人尿酸化、超滤、树脂分离后所得。基础研究显示CDA-2不仅能诱导多种肿瘤细胞凋亡和分化，而且可以逆转肿瘤耐药、防止肿瘤复发和转移，增强放化疗敏感性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床试验及临床应用证明，对多种肿瘤有良好的效果，且不良反应小。作为一种新型的诱导分化剂，已应用于各种实体瘤及血液系统恶性疾病的治疗。　　亚砷酸，又称三氧化二砷(As2O3)，是诱导分化剂的一次革命，在治疗急性早幼粒细胞白血病上取得了举世瞩目的成绩。而且基础研究及临床实践证实，亚砷酸对CML、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤等有一定的治疗作用。但是，对CML的治疗效果以及不良反应，限制了其应用。因此，提高亚砷酸对CML的疗效，控制急性和慢性不良反应日益受到关注。临床及实验证实亚砷酸不良反应与剂量存在明显的相关性，因此，增强亚砷酸的诱导分化作用，控制其不良反应，适当减少剂量是关键措施之一。　　诱导分化剂开辟了血液系统恶性疾病治疗的新途径，治疗作用不断强化，适用范围不断扩展。而针对性不强及药物不良反应、经济条件不足，以及开发和利用新的诱导分化剂的漫长过程，很难满足临床的需要，因此联合目前的诱导分化剂，提高疗效、减少药物不良反应、减轻经济负担是基础及临床研究者面临的重要课题和严峻挑战。　　方法：不同浓度的尿多酸肽、亚砷酸及二者联合处理K562细胞株，通过台盼蓝拒染法和MTT比色法检测K562细胞增殖抑制率和细胞生长率；应用倒置相差显微镜、AO荧光染色观察细胞凋亡及形态学变化；应用流式细胞术检测细胞凋亡。　　结果：　　1 K562细胞形态的观察　　倒置相差显微镜：随着尿多酸肽、亚砷酸及二者联合用药浓度的增加及作用时间的延长，K562细胞皱缩变小，核固缩呈均匀的致密物，细胞膜出现伪足样突起，细胞折光性差，最后细胞膜不完整，形成细胞碎片。联合用药组比相同浓度的单药组凋亡及坏死细胞增多。　　荧光染色：未经药物处理的对照组为正常活细胞，圆形，核呈黄绿色均匀荧光，胞质呈橘红色荧光。凋亡细胞可见核呈黄绿色致密浓聚在核膜内侧，胞膜呈泡状膨出，细胞形态不规则，可见黄绿色碎片。　　2台盼蓝拒染法检测K562细胞增殖抑制率，死细胞被染成蓝色，而活细胞拒染。　　2.1尿多酸肽组：相同作用时间，随着尿多酸肽浓度的增加，细胞增殖抑制率升高；同一浓度的尿多酸肽，随作用时间的延长，细胞增殖抑制率升高。但62.5mg/L的尿多酸肽，各时间段细胞增殖抑制率无差异(P>0.05)。通过SPSS软件测得，尿多酸肽作用K562细胞24小时、48小时、72小时的IC50值分别为75mg/L、59mg/L、37mg/L。　　2.2亚砷酸组：不同浓度亚砷酸，随着药物浓度的增加，对细胞增殖抑制率呈剂量依赖性增加；同一浓度的亚砷酸，随作用时间延长，对细胞增殖抑制率呈时间依赖性增加。其中，相同作用时间组中0.25μmol/L的亚砷酸和0.50μmol/L的亚砷酸对K562细胞的增殖抑制率影响无差别(P>0.05)，余各浓度之间均存在差异，有统计学意义(P<0.05)。通过SPSS软件测得，亚砷酸作用K562细胞24小时、48小时、72小时的IC50值分别为11.55μmol/L、6.14μmol/L和5.18μmol/L。　　2.3联合用药组：二者联合对K562细胞的增殖抑制作用亦成浓度及时间依赖性。以8μmol/L的亚砷酸联合125mg/L的尿多酸肽作用于K562细胞72小时为例，其增殖抑制率为94.70%±0.72％，而8μmol/L亚砷酸单独作用于K562细胞72小时的增殖抑制率为74.61％±0.55％，尿多酸肽125mg/L单独作用于K562细胞72小时的增殖抑制率为86.33％±1.12％(P<0.05)，有统计学意义。　　3 MTT比色法测定K562细胞生长率　　3.1尿多酸肽组：尿多酸肽浓度在31.25mg/L以上时，K562细胞的生长率存在剂量及时间依赖性降低，但125mg/L与250mg/L比较，P=0.198，无统计学意义。　　3.2亚砷酸组：亚砷酸作用于K562细胞24小时及48小时，在0.25μmol/L到4μmol/L浓度范围内，细胞的生长率变化不大，但在4μmol/L到16μmol/L浓度范围，细胞的生长率有明显降低，亚砷酸作用于K562细胞72小时，从1μmol/L开始细胞的生长率即有明显变化(P<0.05)。　　3.3联合用药组：相同浓度的亚砷酸与尿多酸肽联合，随尿多酸肽浓度增加，细胞生长率下降；相同浓度尿多酸肽与亚砷酸联合，随亚砷酸浓度增加，细胞生长率也呈下降趋势。按照公式：预计效应C=A×B，AB