目的：食源性致病菌污染是影响我国食品安全的最主要因素之一。本研究的总体目标旨在以大肠杆菌O157等食源性致病菌的特异双链DNA为靶标分子，获得高特异性双链DNA结合蛋白，并为建立食源性致病菌快速检测方法提供研究思路。分目标是利用生物信息学技术得到特异的靶标物质的DNA序列，建立特异的TALEs DNA模板，通过大肠杆菌系统翻译，获得特异的高亲和力的DNA结合蛋白，并且尝试建立可行的实验室检测方法，对TALEs体外识别的方法进行有效探索。　　方法：1、应用商业化产品与实验室结合的方法，先根据目的DNA构建可用于体内基因组敲除的TALENs，然后通过测序以及生物信息学的其他技术排除重复序列众多的干扰，寻找到完整的TALENs基因，再鉴定发挥识别DNA功能的TALEs，最后通过特异引物的设计采用PCR的方法获得特异TALEs的基因；2、通过大肠杆菌原核表达系统，建立pET-22b-TALEs表达载体。先对其进行小量的诱导表达，摸索实验条件。当条件成熟后再对其进行大量诱导表达，最后实现TALEs蛋白的高效可溶性表达；3、通过金属螯合层析技术，利用6×His标签可以与金属离子镍产生有生物选择行的结合的特点，建立完备成熟的TALEs蛋白纯化实验室程序；4、通过凝胶阻滞和SPR的方法证明TALEs在体外环境下与DNA的结合能力；5、通过生物素-链霉亲和素系统将目标DNA连接到聚苯乙烯材料材料上，再通过TLAEs与DNA特异结合的原理，并对实验条件进行一系列的探索优化之后，初步实现基于ELISA的TALEs检测DNA的目的。　　结果：1、成功的在获得了TALEs蛋白的基因，长度约2100bp，并通过测序证明该序列正确可以正确翻译；2、通过构建的表达载体，成功的实现了TALEs蛋白的大量可溶性表达，并通过蛋白纯化获得了纯度较高的含有6×His标签的目的蛋白；3、将生物素标记的双链DNA结合在金片上，将目的蛋白稀释不同的梯度，利用SPR技术证明了TALEs在体外环境中可以结合双链DNA。4、当TALEs蛋白与完全匹配的DNA结合时，整个DNA的分子量会变大，当DNA存在错配时，这种结合就会减弱。因此采取了凝胶阻滞实验，通过调整实验条件在琼脂糖凝胶电泳中再次得到了TALEs体外结合DNA的结果；5、探索了基于ELISA法的TALEs结合DNA的实验，通过实验条件的调整初步实现了采用ELISA法的思路对体外目的DNA特异性检测的目的。并通过统计分析得到差异有统计学意义（p＜0.05），与其他实验结果相互印证。　　结论：1、通过适当理性设计，能够在10天之内成功获得可特异结合dsDNA的TALEs基因；2、通过原核表达获得的含有6×His标签的目的蛋白经过纯化能够满足后续实验需要；3、通过灵敏度高的SPR和灵敏度较低的凝胶阻滞实验均能证明TALEs与DNA在体外的结合能力；4、通过实验初步证明了采用TALEs基于ELISA法能够在体外检测大肠杆菌16S rDNA。