PI3K-Akt与尼古丁抑制小胶质细胞增殖相关性研究

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目的:探讨谷氨酸对小胶质细胞增殖的影响、尼古丁对小胶质细胞自身增殖的影响以及PI3K-AKT与尼古丁抑制小胶质细胞增殖的相关性。方法:本实验首先用MTT法检测小胶质细胞系BV-2细胞的存活率,分设置了单独添加谷氨酸组(浓度分别为250μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L、2000μmol/L)、单独添加尼古丁组(浓度分别为0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)以及谷氨酸(浓度为500μmol/L)和尼古丁(浓度分别为0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)共同添加组共3大组,每组又分别设置24h及48h两个时间;采用Western Blot检测PI3K相关蛋白(P85、Akt蛋白)的表达情况,分别设置了单独添加尼古丁组(10μmol/L)、单独添加谷氨酸组(500μmol/L)、谷氨酸(500μmol/L)与尼古丁(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)共同添加组,每组又分别设置24h及48h两个时间。结果:通过MTT检测发现:1.谷氨酸促进小胶质细胞OD值增高,500μmol/L效果最显著;2.尼古丁使小胶质细胞OD值降低,0.1μmol/L~10μmol/L之间存在量效关系;3.尼古丁能够抑制谷氨酸诱导的小胶质细胞OD值的升高。通过Western Blot实验观察到:1.谷氨酸(浓度500μmol/L)使小胶质细胞PI3K-Akt信号通路的P85、Akt蛋白表达增多;2.尼古丁能够抑制小胶质细胞PI3K-Akt信号通路的P85、Akt蛋白表达;3.在尼古丁存在的条件下,谷氨酸未能使小胶质细胞PI3K-Akt信号通路的P85、Akt蛋白表达增多;4.P85与Akt蛋白表达存在显著正相关。结论:1.谷氨酸可以促进小胶质细胞增殖;2.尼古丁可以抑制小胶质细胞的自身增殖3.尼古丁可以抑制谷氨酸诱导的小胶质细胞的增殖;4.PI3K-AKT信号通路参与尼古丁抑制小胶质的细胞增殖。
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