背景： 乳腺癌是一种严重威胁女性健康和生命安全的恶性肿瘤,全世界每年约有一百多万妇女患有乳腺癌,占女性恶性肿瘤的首位。乳腺癌的治疗以手术、放疗、化疗、内分泌治疗、免疫治疗等综合治疗为主；其中放疗、化疗等都存在选择性不高的缺点,在杀伤肿瘤细胞同时,也可能损害体内某些类型的正常细胞、组织和器官,治疗中常出现较明显的毒副作用；尤其不适合一般情况差、年龄很大和不愿意放化疗的患者；而随着中西医结合防治肿瘤的研究发展,使中医中药在肿瘤的治疗中发挥了其独特的优势。 灵芝是一种珍贵的药用真菌,历代医家都认为灵芝能治疗多种疾病,被公认为扶正固本,滋补强身作用的传统中药。孢子是灵芝发育后期弹射出来的种子,将其集中起来后呈细末状,通称为灵芝孢子粉。其主要成分有多糖、三萜类、核苷、腺嘌呤、有机锗、麦角甾醇、维生素、胡萝卜素及微量元素等。灵芝孢子具有坚硬的双层壁结构,非常坚固,且耐酸碱,极难氧化分解,其有效成分难以被人体吸收利用,为了更好利用灵芝子内的有效物质,必须对孢了粉进行破壁。破壁灵芝孢子粉有助于吸收。大量的研究表明灵芝孢子粉具有抗肿瘤和增强免疫功能作用[1-3]。多数研究报道认为灵芝孢子在体外没有直接的抑制或杀伤肿瘤细胞的作用,然而体内给药却具有良好的抗肿瘤作用。因此,一般认为灵芝孢子的抗肿瘤作用是通过机体内部的抗肿瘤机制间接杀死肿瘤细胞,主要通过增强免疫功能而介导的。但其确切机制仍然不是十分清楚,有待深入研究。在国内使用的实验动物都足用小鼠、大鼠等小动物,但小动物不能在同一动物上多次采样且采血量小,不能很好地、系统地观察到灵芝孢子粉药效和副作用。为进一步更好地研究破壁灵芝孢子粉其作用,作者选用大动物——新西兰兔。灵芝孢子粉治疗动物移植肿瘤、而动物选用新西兰兔这方面的实验在国内还未见报道。 兔的移植瘤种比较少,作者选用VX2瘤株,此瘤株足Kidd在1938年用shope病毒诱发出兔乳头状瘤,其继发恶变为鳞状细胞瘤.经72次种植传代后正式建株.成为VX2瘤株。该瘤株具有可多部位种植及种植后成活率商、生物学性质稳定、生长迅速、易转移等特点。作者在实验中观察了破避灵芝孢子粉对荷VX2乳腺癌兔的生存期、乳腺肿块、转移的影响。同时进行血液检测,包括外周血的白细胞leukocyte count(WBC)、血红蛋白hemoglobin(Hb)、血小板platelet(PLT))、谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Ccr)、总胆固醇(T-ch)、甘油三脂(TG)以及用兔肌钙蛋白T(cTnT)测定,了解破壁灵芝孢子粉的副作用；为临床用破壁灵芝孢子粉治疗肿瘤提供依据。 研究目的： 探讨灵芝的孢子粉对荷VX2乳腺癌兔的作用：观察灵芝孢子粉的疗效和副作用。 研究方法： 取1 ml瘤组织块悬液于兔后腿外侧肌肉内,2周左右可形成实质性包块,即制成传种兔。在无菌条件下切取传种兔后腿VX2瘤株实体瘤,生理盐水冲洗后放置于盛有20 ml RPMI1640液的玻璃皿中,取瘤体边缘生长旺盛的鱼肉样组织约5 mm×5 mm×5 mm,用眼科剪剪成直径0.5～1 mm的组织块,与20ml RPMl1640液-起抽入20 ml注射器内,即制成组织块悬液。兔清醒状态下仰卧,固定、脱毛,消毒后于兔胸壁左侧第2乳头的乳垫下,注射组织块悬液1 ml。2周后,将成功接种荷VX2乳腺癌兔随机分为灵芝组和对照组,对照组以0.5％羧甲基纤维素钠6.67ml·kg-1·d-1灌胃,灵芝组灵芝孢子粉2g·kg-1·d-1灌胃。连续灌胃至死亡或实验结束(10周时结束实验)。动物自然死亡后或结束时常规解剖兔子的尸体,了解转移种瘤情况。记录动物的生存时间。2～10周每周(或死亡后、结束时)测量瘤体长径(a)和横径(b),计算肿瘤的大小=长径(a)×横径(b)。检测肿瘤接种前、肿瘤接种后2周(用药前)和肿瘤接种后6周(用药后4周)的外周血的白细胞leukocyte count(WBC)、血红蛋白hemoglobin(Hb)、血小板platelet(PLT))的情况。检测肿瘤接种后2周(用药前)和肿瘤接种后6周(用药后4周)的谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Ccr)、总胆固醇(T-ch)、甘油三脂(TG)以及用药前、用药后4、5、6周兔肌钙蛋白T(cTnT)测定。记录动物的生存时间。用Kaplan-Meier进行生存曲线分析,Log Rank进行生存曲线显著性检验；比较肿瘤人小和血液检测的变化。 结果： 1.实验结束时灵芝组60％的荷VX2乳腺癌兔仍生存,中位生存期大于70天：而对照组只有20％的荷VX2乳腺癌兔尚存活,中位生存期为43天。用LogRank进行生存曲线显著性检验,两组生存期差别有统计学意义(p<0.05)。 2.灵芝组与对照组两组乳腺原发病灶随兔的生存时间延长而进行性增大,两组原发病灶的比较在2,3,4,5周时无统计学显著差异(P值>0.05)。 3.观测肿瘤接种前、肿瘤接种后2周(用药前)、肿瘤接种后6周(用药后4周)的外周血(白细胞、血红蛋白、血小板)变化,发现用药后4周灵芝组与对照组的白细胞数(P值<0.05)的差异有统计学意义；其余指标差异无统计学意义. 4.用约后4周灵芝组与对照组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血清尿素氮、血肌酐、总胆固醇、甘油三脂等指标的差异无统计学意义(P值>0.05)。 5.用药后6周,灵芝组的肌钙蛋白T低于对照组,差异有统计学意义(P值<0.05);用药后4、5剧的差异无统计学意义。 结论： 灵芝孢子粉能延长荷VX2乳腺癌兔的生存期,提高白细胞,增强免疫功能,延缓和减少远处转移：但灵芝孢子粉对兔的乳腺移植肿瘤没有直接抑制作用。对其它血液检测无不良影响。提示灵芝孢子用于辅助治疗荷VX2乳腺癌兔安全、有效。