IP-10、Mig及其受体CXCR3在缺氧血脑损伤新生大鼠脑组织中的表达及参附注射液干预作用的研究

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong456
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目的:研究新生大鼠脑缺氧缺血后趋化因子IP-10、Mig及其受体CXCR3在脑皮质和海马中的动态变化及参附注射液对其的干预作用。   方法:新生7d龄SD大鼠分为假手术组(S)、生理盐水对照组(C)、参附治疗组(SF),每一组按照观测的时间点不同分为1h、3h、12h、48h、3d、7d、14d七个亚组,每个亚组8只。用Rice法制备新生大鼠HIBD模型。在每个时间点将大鼠断头取右侧脑组织,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠脑组织中IP-10、Mig及其受体CXCR3的mRNA表达变化;采用Western-Blot法测定IP-10、Mig、CXCR3的表达变化;采用免疫组化法和免疫荧光法分别测定CXCR3、IP-10、Mig在脑组织中的表达变化。   结果:   (1)不同时间点各组新生大鼠脑组织中蛋白表达的变化   皮层:S组各时间点均无IP-10、Mig表达,CXCR3有少量表达;C组与S组比较,在HI后IP-10于lh开始增加,3h达到高峰,7d后逐渐下降,Mig于12h开始增加,48h达到高峰,3d后逐渐下降,CXCR3于1h开始增加,3h达到高峰,48h后逐渐下降,14d时与S组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);SF组IP-10、CXCR3的表达在HI后1h、14d,与C组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),3h开始减少,到7d时仍低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。   海马:S组各时间点均无IP-10、Mig表达,CXCR3有少量表达;C组与S组比较,在HI后IP-10于3h开始增加,12h达到高峰,7d后逐渐下降,Mig于48h开始增加,3d达到高峰后逐渐下降,CXCR3于3h开始增加,12h达到高峰,48h后逐渐下降,14d时与S组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);SF组IP-10、CXCR3的表达在HI后3h开始减少,到7d时仍低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。   (2)HI后脑皮质与海马组织细胞中IP-10mRNA、MigmRNA、CXCR3mRNA表达均增加,且与IP-10、Mig、CXCR3的表达在时间上具有一致性;SF组IP-10mRNA、CXCR3mRNA的表达在HI后1h开始减少,到7d时仍低于C组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。   (3)CXCR3(3h)免疫组化结果:SF组COD值低于C组,组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05):IP-10(3h)、Mig(48h)免疫荧光结果:阳性细胞数比较,S组均未观察到阳性细胞,SF组数值均低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。   结论: HI后大鼠脑组织中IP-10、Mig、CXCR3及其mRNA表达均是增加的;IP-10表达高峰出现的时间早,持续时间长;参附注射液在HI后1h下调IP-10mRNA、CXCR3mRNA的表达,3h下调IP-10、CXCR3蛋白的表达,从而减少过度炎症反应,起到对HIBD新生大鼠的保护作用。
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