猴头菌素的提取、微胶囊制备及其生物活性研究

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猴头菌作为一种珍贵的大型食药真菌,富含多种生物活性物质。本文以猴头菌多糖提取后的残渣为原料,采用微波萃取技术,提取残渣中的猴头菌素,提高猴头菌利用率。通过单因素试验和正交试验得到提取最佳工艺条件:提取料液比为1:20,提取温度为60℃,提取时间为25 min,静置时间为1 h,猴头菌素得率为4.28%。本文采用两种微胶囊制备工艺制得猴头菌素微胶囊——以β-环糊精为壁材的超声辅助饱和包埋法和以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为壁材的乳化溶剂挥发法。对这两种制备工艺条件进行单因素试验,以包封率为考察指标,得到乳化溶剂挥发法制备的微胶囊包封率较高,并且通过电镜扫描,观察外观形态,猴头菌素/PLGA微胶囊粒径更小,包埋效果更好,并选择以PLGA为壁材进行微胶囊制备技术的进一步研究。在上述单因素试验的基础上,考察不同因素对猴头菌素/PLGA微胶囊制备工艺包封率的影响,再进行响应面分析优化筛选处方和工艺的最佳条件。得到制备猴头菌素/PLGA微胶囊的最佳制备条件:芯壁比为1:1.64,PLGA浓度为15%,搅拌速度为1200 r·min-1,此条件下包封率最高可达99.66%。对微胶囊产品的理化性质进行了考察:傅立叶红外光谱检测表明微胶囊包埋过程为物理混合;体外释放试验表明微胶囊产品包埋效果良好且具有缓释功效。最后对制得的猴头菌素/PLGA微胶囊进行体外抗氧化活性研究及对大鼠星形神经胶质细胞神经生长因子释放的影响进行了考察。结果表明:猴头菌素/PLGA微胶囊具有一定的体外抗氧化活性,还原力与微胶囊的浓度在一定范围内呈线性相关;清除DPPH·自由基和ABTS·+自由基的半数效应质量浓度IC50分别为7.63 mg/mL和10.28 mg/mL。并且具有促大鼠星型神经胶质细胞分泌神经生长因子的功效。在微胶囊产品浓度为2.5μg/mL时,其促进大鼠星型神经细胞(RA)的分泌神经生长因子浓度可达69.33±0.73 pg/mL,说明达到较好的包埋效果。
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