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目的:观察补肾方对慢乙肝患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)上Toll样受体其下游信号转导通路的影响,探讨补肾方对慢乙肝的免疫机制。 方法:选取55例西医诊断为慢性乙型病毒性肝炎(简称慢乙肝),且中医辩证为肝肾不足兼湿热型的慢乙肝患者,予以补肾方治疗12周,并以健康志愿者为对照,采集并分离补肾方治疗前后慢乙肝患者外周血单个核细胞,以酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)的含量;逆转录实时聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription-PCR,RT-qPCR)测定Toll样受体3(toll-like receptor-3,TLR3)、Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)及其下游信号转导通路髓样分化因子88(Myeloid differentitation primary response gene 88,MYD88)和Toll样受体相关干扰素活化因子3(Interferon regulatory factor 3,IRF3)mRNA的表达,同时用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群的表达,用全自动生化分析仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量,罗氏PCR仪检测乙肝病毒定量(HBV-DNA)水平的变化,从分子水平探讨补肾方对Toll样受体及其下游信号转导通道的影响。 结果: ①补肾方治疗慢乙肝,中医辨证为肝肾不足兼湿热型的患者的显效率(完全应答)为20%(11/55例),有效率(部分应答)为61.82%(34/55例),总有效率(有应答)为81.82%(45/55例)。 ②补肾方治疗后,患者外周血T细胞亚群有所改善,CD8+T细胞数值下降,CD3+,CD4+T细胞数值上升,CD4+/CD8+数值恢复正常,补肾方治疗有效组(应答组)患者外周血T细胞亚群(CD8+,CD3+,CD4+,CD4+/CD8+)与无效组相比,差异有显著性(P<0.05)。 ③患者在补肾方治疗后,外周血TNF-α较治疗前下降(P<0.05),IFN-γ较治疗后升高(P<0.05)。 ④补肾方可抑制TLR4及MYD88、IRF3 mRNA表达(与治疗前相比P<0.05),同时对TLR3 mRNA的表达有作用(与治疗前相比P<0.05)。 结论:补肾方能抑制TLR4mRNA表达,具有抑制TLR4信号转导的MyD88依赖性途径的作用,同时对TLR3信号转录的MyD88非依赖性途径IRF3mRNA的表达也有影响。