【摘 要】
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从新疆野生雪莲中提取总RNA,运用“SMART cDNA文库构建试剂盒”进行LD-PCR合成双链cDNA;产物经蛋白酶K消化,SfiI酶切,Chroma Spin-400分级分离,回收400bp以上片段。并与λTripLEx2载体连接,体外包装,产生未扩增文库,文库滴度为4.03×107 pfu/ml,重组率为93%。经扩增后滴度为1.75×109pfu/ml。随机挑选120个阳性菌落,碱裂解提取
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从新疆野生雪莲中提取总RNA,运用“SMART cDNA文库构建试剂盒”进行LD-PCR合成双链cDNA;产物经蛋白酶K消化,SfiI酶切,Chroma Spin-400分级分离,回收400bp以上片段。并与λTripLEx2载体连接,体外包装,产生未扩增文库,文库滴度为4.03×107 pfu/ml,重组率为93%。经扩增后滴度为1.75×109pfu/ml。随机挑选120个阳性菌落,碱裂解提取质粒DNA,经测序得到80个有效EST序列。GenBank网上进行BLAST同源性分析,有52个序列有同
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