不同苦瓜品种分类分析与降糖多肽的表达研究

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苦瓜是一种常用的食药两用植物,其主要降血糖活性成分为多肽和皂甙两大类物质,降血糖效应已被动物实验和临床治疗所证实,本课题对苦瓜降血糖多肽的表达等内容进行了研究。   首先,优化了苦瓜不同组织RNA提取方法,成功获得了各种组织的高质量RNA。采用降糖多肽-P基因序列利用RT-PCR技术对苦瓜植株不同营养器官中降糖多肽的表达分布进行研究,结果表明苦瓜多肽-P基因主要在果肉和种子中表达,为苦瓜降血糖药材的综合利用提供了依据。   其次,对已收集的国内外近三十种不同苦瓜品种进行分类挑选,选择代表性品种进行育苗和大田种植,成功收获了17种不同苦瓜品种的果实。分离提取了不同品种苦瓜苗的基因组DNA,利用PCR技术克隆分析了降糖多肽-P基因序列的相似性,结果表明不同苦瓜品种间多肽-P基因序列没有明显差异。   最后,鉴于苦瓜品种繁多,不同品种间的降血糖效果存在着明显差异。本研究采用RAPD和ISSR分子标记,对上述17种不同苦瓜品种的果实进行了鉴定分类,分别筛选了RAPD和ISSR各10条引物对苦瓜的表型特征和基因型相关性进行了探索,实验结果显示用RAPD方法可将收集的苦瓜品种初步分成三个组别,而用ISSR方法则将收集的苦瓜品种分成了二个组别。该实验结果可结合不同品种多肽-P基因的表达分析,为后续鉴定苦瓜降血糖多肽高表达的优质品种奠定基础。  
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