目的:在细胞水平探讨GST标签的人纤溶酶原Kringle5基因工程蛋白(GST-K5m)抗血管增生的作用。　　方法:利用primer premier5.0引物设计软件，PCR法得到K5m基因，再利用基因工程技术，将目的基因克隆至pGEX-4T-3的BamHI和XhoI位点。再将该pGEX-4T-3/K5m重组质粒转染到BL21(DE3)宿主菌中，表达出可溶性重组蛋白。采用GST树脂亲和纯化融合蛋白，对纯化的融合蛋白进行SDS-PAGE电泳和Western-blot分析鉴定，结果显示得到分子量约为37kDa的融合蛋白。为了验证GST-K5m融合蛋白是否具有生物学活性，用不同浓度的(25-1280nmol/L)GST-K5m融合蛋白分别处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)、肝癌细胞(Be17402)和正常肝细胞(NLC)，MTT法检测各组的细胞抑制率，PI单染法和hoechst33258染色法标记各组凋亡细胞。用不同浓度的GST-K5m融合蛋白及His6-K5重组蛋白处理HUVECs，接着用transwell实验检测GST-K5m融合蛋白对人脐静脉内皮细胞迁移功能的影响。　　结果:GST-K5m融合蛋白可抑制人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖，呈浓度依赖关系，但是对肝癌细胞和正常肝细胞存活率无明显影响;GST-K5m融合蛋白对正常肝细胞(NLC)和肝癌细胞(Be17402)无明显凋亡诱导作用，但具有诱导内皮细胞凋亡的作用;GST-K5m融合蛋白及His6-K5重组蛋白均抑制HUVEC的迁移。　　结论:1、构建了pGEX-4T-3/K5m重组质粒，并获得带GST标签的GST-K5m融合蛋白。2、体外实验证实，GST-K5m重组蛋白可特异性的抑制血管内皮细胞增殖和迁移，并诱导内皮细胞的凋亡，且对肝癌细胞和正常肝细胞无明显的效应。