胶原/壳聚糖/穿膜肽凝胶的制备及其效应的研究

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背景胶原蛋白是细胞外基质的重要组分之一。其富有机体所需的甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸,生物相容性好,可降解,低抗原活性,对组织的愈合起着重要作用。胶原蛋白的运用遍及食品、医药等很多行业。尤其是在医用材料和递药方面,胶原蛋白具有很好的应用前景。特别是鱼类胶原蛋白具有来源广泛,处理相对方便等优点而受到广泛的关注。壳聚糖来源于甲壳素,资源极其丰富。它不但没有毒性,而且相容性好。壳聚糖可以抗菌,止血,促进组织修复与伤口愈合。其在医用敷料与递药领域的应用成为研究的热点。细胞穿膜肽又被称为蛋白转导结构域,可分为阳离子型和两亲型。它是可以将大分子带入细胞的短肽。因为它们独特的转运方式,也有人称之为特洛伊木马肽。它可以携带各种大分子穿越生物膜与血脑屏障。其在炎症、肿瘤、缺血性和脑疾病的治疗,疫苗领域,生物活性物质递送方面等都有应用。目的研发新型胶原/壳聚糖/穿膜肽复合凝胶。通过特殊的物理交联法成功制备胶原/壳聚糖/穿膜肽凝胶,并且对其进行了理化分析和相关特性的评估。最后分析了该凝胶的体外活性与在体效应。方法1.制备表征与理化分析:采用物理交联法以壳聚糖、胶原、穿膜肽为材料,β-甘油磷酸钠为引发剂,成功制备了胶原/壳聚糖/穿膜肽复合凝胶。然后用扫描电镜、红外、差示等对其进行了分析。并且对不同凝胶的PH、凝胶时间、渗透压、溶胀率等进行了评估。2.体外活性分析:选用L929成纤维细胞来研究复合材料的细胞毒性。然后选取金黄色葡萄球菌来分析不同材料的抑菌情况。3.在体效应研究:用小鼠表皮创伤模型,研究不同凝胶对ICR小鼠表皮组织愈合的效应。试验包括小鼠表皮创伤模型的制备与给药、创伤恢复状态的考察、愈合率的分析、创面蛋白含量的测定、组织切片HE染色等。结果1.差示、差热分析、红外分析等结果都共同证明了本课题组的壳聚糖凝胶、胶原/壳聚糖凝胶和胶原/壳聚糖/穿膜肽凝胶都制备成功。PH、凝胶时间、渗透压、溶胀率等结果表明胶原/壳聚糖/穿膜肽凝胶具备作为医用敷料的优良特性。2.细胞毒试验结果表明制备的各种凝胶基本没有细胞毒性,完全符合医用材料的标准。抑菌性试验结果表明胶原/壳聚糖/穿膜肽组的抑菌作用强于壳聚糖与胶原壳聚糖组。3.小鼠在体试验结果表明胶原/壳聚糖/穿膜肽凝胶组的愈合率最高,愈合最快,创面蛋白含量最高,组织切片观察到的愈合效果更好,这些说明其比壳聚糖凝胶和胶原壳聚糖凝胶更能有效的促进小鼠表皮创伤的愈合。结论本课题组通过特殊的物理交联方法成功合成了胶原/壳聚糖/穿膜肽凝胶复合材料,并且它具备医用敷料的优良理化特性,其基本无毒,抗菌作用强,可加快小鼠表皮创伤组织的修复。因此,该复合凝胶材料在医用敷料领域将具有广阔的应用前景。
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