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非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是一类主要表现为与酒精摄入无关的肝脏脂肪沉积、肝脏脂肪性变的临床病理综合征。据统计,全世界约有10亿人患有NAFLD,在我国有近3亿人患有NAFLD,NAFLD除了可直接导致肝硬化、肝癌外,还参与动脉粥样硬化和II型糖尿病的发病,严重威胁着人类的健康。NAFLD会导致肝细胞受损,损伤和坏死的肝细胞释放损伤相关的模式分子(damage-associated molecular patterns,DAMP),DAMP被免疫系统识别,从而引发炎症反应。本研究通过检测NAFLD患者和健康人的血清中的IL-1β、IL-6和TNF-α的水平,发现NAFLD患者血清中三种细胞因子的水平显著高于健康人,取NAFLD患者外周血上血液分析仪检测,发现NAFLD患者外周血的中性粒细胞的比例显著高于健康人(p<0.05)。随后我们构建NAFLD小鼠模型,取外周血上血液分析仪检测,发现NAFLD模型小鼠的外周血中的中性粒细胞的比例显著高于正常小鼠;检测NAFLD模型小鼠的肝脏中的中性粒细胞胞外菌阱(neutrophil extracellular traps,NETs)的水平,发现NAFLD模型小鼠的肝脏中NETs的水平显著升高,检测NAFLD模型小鼠的肝细胞的坏死,发现NAFLD模型小鼠的肝细胞坏死水平高于正常小鼠,分别加入MPO-DNA和Cit-H3的抑制剂后NAFLD模型小鼠的肝细胞坏死水平下降。我们将NAFLD模型小鼠的中性粒细胞与NAFLD模型小鼠的肝脏中的Kuffer细胞共孵育,检测培养基上清中的IL-1β、IL-6和TNF-α的水平,发现3种细胞因子的水平显著升高。为研究NAFLD中损伤的肝细胞通过何种信号通路激活中性粒细胞,导致NETs水平升高,我们将500μg anti-Ly6G抗体注射到NAFLD模型小鼠体内来删除其中性粒细胞,24h后分别将TLR4ko或TLR9ko的中性粒细胞过继到NAFLD模型小鼠体内,24h后检测肝组织中NETs、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平,发现过继TLR4ko、TLR9ko的中性粒细胞后的NAFLD模型小鼠的肝脏中NETs和TNF-α的水平均显著下降,肝细胞的凋亡水平下降。本次研究表明,NAFLD模型小鼠中,肝细胞受损后释放DAMP,通过TLR4和TLR9信号通路激活了中性粒细胞,肝组织中NETs水平升高,导致更多的肝细胞坏死,中性粒细胞还能激活Kuffer细胞,促进其IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌,从而进一步加重了肝脏的炎性损伤。