【摘 要】
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凝血因子Ⅶ不仅适用于先天性和获得性FⅦ缺乏症的病人,而且还适用于治疗存在FⅦ和FⅨ抑制物的和抗体血友病病人,以及血小板减少症和血小板功能障碍病人的出血止血和出血预防
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凝血因子Ⅶ不仅适用于先天性和获得性FⅦ缺乏症的病人,而且还适用于治疗存在FⅦ和FⅨ抑制物的和抗体血友病病人,以及血小板减少症和血小板功能障碍病人的出血止血和出血预防等,凝血因子Ⅶ还可以作为广泛的止血剂用于普通病人的创伤性大出血的止血。但利用传统方法从血浆中提取凝血因子Ⅶ的产量非常有限,不仅产量上无法满足市场的需求,而且还存在一定的安全隐患。本文首先构建筛选获得了高表达凝血因子Ⅶ(rhFⅦa)蛋白的稳定重组CHO细胞株。在此基础上无血清悬浮驯化重组细胞株,实现了无血清悬浮培养。并通过培养基优化以及培养工艺的研究,建立了高效的rhFⅦa无血清反应器悬浮流加培养工艺,蛋白表达量达接近1mg/L。之后,对rhFⅦa的纯化工艺进行了初步研究,建立了利用阴离子交换柱层析纯化rhFⅦa的初步纯化工艺。
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