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研究目的多药耐药(multidrug resistance, MDR)是人急性白血病化疗失败的主要原因,其发生机制很多,其中一个重要因素是mdr-1基因及产物P-glycoprotein(P-gp)表达。核因子κB(NF-κB)是一个普遍存在的核转录因子,在炎症应激反应和细胞生存中发挥重要作用。近来发现NF-κB在mdr-1的表达调控中起重要作用,但仅限于在细胞系中,尚未见在原代肿瘤细胞中关于NF-κB在mdr-1表达调控中作用的研究。本实验在初发急性髓细胞性白血病(AML)中筛选原发耐药标本,并在原发耐药细胞中探讨NF-κB在mdr-1转录调控中的作用。研究方法初发AML病人骨髓或者外周血,单个核细胞分离,免疫细胞化学P-gp抗体染色检测P-gp表达,流式细胞仪荧光染料罗丹明123(rhodamine123, Rho123)泵出实验检测P-gp功能,两者联合筛选原发耐药AML标本。设立对照组和实验组,实验组加入蛋白酶抑制剂MG-132 1.0μmol/L,培养6 h后NF-κB P65抗体染色,激光共聚焦显微镜观察NF-κB在细胞中分布,检测其活性变化;real-time PCR方法检测mdr-1 mRNA;AnnexinV +7AAD双标,流式细胞仪检测MG-1321.0μmol/L处理6h、12h细胞凋亡。研究结果36例初发的AML中,同时满足免疫细胞化学染色实验阳性和Rho123泵出实验阳性的原发耐药标本11例,占全部标本30.6%。MG-132处理6h,NF-κB在细胞核中分布明显减少,活性明显受抑,mdr-1 mRNA水平明显减少,对照组mdr-1 mRNA是实验组4.3±2.3倍。MG-132处理12h细胞发生明显凋亡,平均存活率为49±9%,低于12h对照组细胞的平均存活率79±3%(P<0.01);MG-132处理6h细胞凋亡发生不明显,平均存活率为82±5%,6h对照组细胞平均存活率为86±5%,两组无显著性差异(P>0.05);MG-132处理12h组细胞平均存活率49±9%明显低于6h组82±5%(P<0.01)。研究结论11例原发耐药标本同时满足免疫细胞化学染色实验阳性和Rho123泵出实验阳性。NF-κB能正调控多药耐药基因mdr-1的转录,NF-κB活性的抑制能够导致mdr-1的表达减少和原发耐药AML细胞凋亡增加。