【摘 要】
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目的观察趋化因子MCP-1、FKN及细胞因子TNF-α在大鼠缺血再灌注后缺血区脑组织中的表达,探讨三者在再灌注炎症中的变化规律及意义。方法102只体重约250-300g健康成年雄性SD大
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目的观察趋化因子MCP-1、FKN及细胞因子TNF-α在大鼠缺血再灌注后缺血区脑组织中的表达,探讨三者在再灌注炎症中的变化规律及意义。方法102只体重约250-300g健康成年雄性SD大鼠,随机分为9组：正常组(n=6)、假手术组(n=12)、缺血2h再灌注3h组即I2h／R3h(n=12)、I2h／R6h组(n=12)、I2h／R12h组(n＝12)、I2h／R24h组(n=12)、I2h／R48h组(n=12)、I2h／R72h组(n=12)、I2h／R7d组(n=12)。采用Longa线拴法[1]制备大脑中动脉栓塞模型(MCAO),术后评估大鼠神经功能情况。正常组、假手术组、I／R各亚组每组各6只大鼠,采用尼氏体染色观察脑组织病理学变化；免疫组织化学法检测各组FKN、MCP-1、TNF-α在缺血区脑组织免疫阳性细胞的表达变化。假手术组、I／R各亚组各6只大鼠,应用Western blot方法检测缺血再灌注后各时间点FKN蛋白的表达水平。结果1.尼氏体染色示：正常组及假手术组大鼠缺血区脑组织内尼氏体大,数量多；与正常组及假手术组相比,再灌注后3h组、6h组尼氏体含量逐渐减少(P>0.05),12h组、24h组、48h组、72h组、7d组尼氏体含量进一步减少(P<0.05)。2.免疫组化结果示：TNF-α在正常组及假手术组少量表达,两组间差异无统计学意义(P>0.05)；TNF-α在再灌注后早期(3h组)即出现表达上调(P<0.05),24h组表达达高峰(P<0.05),随后逐渐下降,7d组TNF-α阳性细胞表达数回归基线水平(P>0.05)。趋化因子FKN在正常组和假手术组均有一定数量的表达,两组间差异无统计学意义(P>0.05)；再灌注后3h组表达上调(P<0.05),24h组达高峰(P<0.05),然后逐渐下降,7d组阳性细胞表达数差异与正常组及假手术组相比无统计学意义(P>0.05)。趋化因子MCP-1在正常组及假手术组极少量表达,再灌注后其表达上调稍延迟,于6h组出现升高(P<0.05),48h组达高峰(P<0.05),然后逐渐下降,7d组表达仍较高(P<0.05)。3.Western Blot检测示：FKN在假手术组有一定水平的表达,再灌注后3h组表达即有上调(P<0.05),24h组表达水平最高(P<0.05),48h组仍有较高的表达水平(P<0.05),7d组回归基线水平。结论1.大鼠脑缺血再灌注后损伤区早期即出现TNF-α表达上调,提示TNF-α可能促发缺血再灌注后炎症反应。2.趋化因子FKN及MCP-1在缺血再灌注后脑组织中表达上调,并出现动态变化趋势,提示二者参与了脑缺血再灌注损伤后炎症反应过程。3.MCP-1表达上调及高峰落后于TNF-α、FKN,提示MCP-1表达增多,可能与单核细胞吞噬坏死组织、促进神经修复有关。
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