【摘 要】
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目的 探讨人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）体外原代培养条件,探讨沙利度胺（thalidomide）对HUVEC的药物作用,为研究沙利度胺对脉络膜新生血管（cho
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目的 探讨人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）体外原代培养条件,探讨沙利度胺（thalidomide）对HUVEC的药物作用,为研究沙利度胺对脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）的作用提供理论基础。建立小鼠CNV模型,给小鼠腹腔注射沙利度胺,通过病理学检查,评价药物疗效,同时评价沙利度胺的安全性和毒副作用。 方法 1 HUVEC原代培养及沙利度胺抑制细胞增殖实验研究 1.1 HUVEC原代培养方法 取足月新生儿脐带,彻底清洗干净,采用自治装置,注入0.1%的Ⅰ型胶原酶5ml,消化10min,放入离心机中1000r/min,7分钟,用20%胎牛血清的DMEM培养液,移入6孔板培养。Ⅷ因子相关抗原检测法鉴定所培养细胞。 1.2 沙利度胺对HUVEC的抑制作用 沙利度胺溶于0.5%DMSO中,分为3组。A组为沙利度胺组,分4个浓度梯度,分别为10μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、75μg/ml;B组为沙利度胺+地塞米松组,为含1μg/ml地塞米松的各浓度沙利度胺;C组为对照组;各组中DMSO浓度均为0.5%。HUVEC传代植入96孔板,细胞密度为1×104/ml,过夜。然后加入不同浓度的药物,处理72小时;加入MTT液体20μl,CO2培养箱内处理4小时。离心,弃上清液,加入DMSO200μl,在酶标仪570nm波长处读取吸光度（A）值。统计学处理采用
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