胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin-like growth factorⅠ，IGFⅠ）是机体生长、发育和代谢的一个重要调控因子，同时也是生长激素（growth hormone，GH）启动生长活性的主要介导者。它既有类胰岛素样作用又有生长素样作用，能促进肌细胞的分化生长，平衡脂肪的沉积，调节泌乳量，提高消化吸收能力，在人类和动物的繁育过程中发挥着广泛的功能。有研究表明，转人IGFⅠ基因猪与非转基因猪比较，脂肪含量有所下降，瘦肉率增高，其生长速度快且没有转GH基因猪所存在的嗜睡、繁殖能力低等缺点。因此，采用先进的DNA重组.体细胞核移植技术进行转hIGFⅠ基因猪研究具有重要意义。　　 本研究根据GENBANK上公布的MGFⅠ基因序列设计引物，采用RT-PCR技术克隆了hIGFⅠ成熟肽基因序列；构建pcDNA3-1-hIGFⅠ真核表达载体，载体上含有pCMV启动子、neo和amp抗性基因，可以在哺乳动物细胞内高水品稳定表达目的基因；通过脂质体法将重组质粒转染到猪肾上皮（PK-15）细胞中，经G418浓度梯度筛选出单克隆转基因细胞株；利用realtime-PCR和ELISA两种方法检测和鉴定了转基因细胞系对外源基因的表达情况。　　 研究结果如下：　　 1.准确克隆了hIGFⅠ编码成熟肽的基因序列，大小为315bp，与网上公布的序列一致；　　 2.成功构建了pcDN-3-1-hIGFⅠ真核表达载体，并转染到PK-15细胞中；　　 3.通过G418浓度梯度筛选获得8个转hIGFⅠ基因细胞株；　　 4.已获得的转基因细胞株传代前后在转录和翻译水平上对hIGFⅠ基因都有较高的表达。　　 以上结果表明，真核表达载体构建准确，可以正确表达外源基因，所筛选出的单克隆转基因细胞株不但能持续稳定地表达hIGFⅠ蛋白，而且可携带外源基因进行传代，具有良好的遗传稳定性，这为后续转基因实验奠定了理论基础。