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蜂胶是自然界中黄酮类物质含量最高、种类最多的物质之一,具有广泛的生物药理学价值。蜂胶作为天然的营养保健食品和药品,因其富含抗氧化剂-黄酮,越来越受到人们的普遍关注,为了使蜂胶中的黄酮发挥更好的社会效益和经济效益,改进蜂胶黄酮的提取工艺,提高得率以及降低生产成本是目前亟需解决的问题。本文以蜂胶为原料,通过单因素试验、正交试验和均匀设计试验确立了蜂胶黄酮的最佳提取工艺条件,研究了蜂胶提取液清除自由基和抗油脂氧化作用的能力。
首先以芦丁为标准品,利用紫外-可见分光光度法,得出蜂胶黄酮提取的标准工作曲线,标准曲线的回归方程为:C=0.064X-0.0647,其相关系数R2=0.9997呈良好的线性关系;对蜂胶中蜂蜡进行了水浴法、水蒸气法、石油醚法提取工艺的研究,研究结果表明:蜂蜡的感官指标依次为:石油醚法优于水蒸气法,水蒸气法优于水浴法;蜂蜡得率依次为:石油醚法优于水浴法,水浴法优于水蒸气法;黄酮损失率依次为:石油醚法优于水浴法和水蒸气法,水浴法和水蒸气法相当;石油醚法提取蜂蜡的工艺中,石油醚(60～90℃)为三种沸程的石油醚(30～60℃,60～90℃,90～120℃)中最佳的提取蜂蜡溶剂。
在提取蜂胶黄酮的工艺过程中,对蜂胶分别进行了半仿生法提取、模拟半仿生法提取、超声波法浸提和乙醇法浸提。通过单因素试验、正交试验和均匀设计实验确定最佳提取工艺。研究结果表明,半仿生法提取(正交试验),提取时间50min、料液比1∶30(g/ml)、在70℃条件下提取,黄酮得率为25.08％。模拟半仿生法提取(正交试验),提取时间75min、料液比1∶25(g/ml)、在70℃条件下提取,黄酮得率为32.06％。超声波法浸提(均匀设计试验),乙醇浓度100％、回流时间0.5 h、在90℃条件下提取,黄酮得率为35.06％。乙醇法浸提(单因素试验和正交试验),乙醇浓度95％、固液比1∶8、提取时间16小时、在20℃条件下提取,黄酮得率为31.2％。
分别进行了四种不同提取方法所得提取物的总抗氧化活性的测定、清除羟自由基能力测定以及清除超氧阴离子能力测定。测定结果均表明:蜂胶的半仿生提取物抗氧化活性大大优于其它三种方法;考察了蜂胶半仿生提取物对猪油和菜籽油的抗氧化能力以及蜂胶的半仿生提取物与其他增效剂之间的协同增效作用。结果表明蜂胶半仿生提取物对猪油和菜籽油的抗氧化作用明显,在与其他常用增效剂的协同增效方面表现出很大的潜力。