目的:分析慢性淋巴细胞白血病（Chronic lymphocytic leukemia,CLL）患者血浆抗人红细胞抗体水平、CD4⁺CD25⁺调节性T细胞（CD4⁺CD25⁺ regulatory T cell,Treg）表达以及Treg与CLL相关性自身免疫性溶血性贫血（Autoimmune Hemolytic Anemia,AIHA）的关系,揭示Treg在CLL发病、病程进展中所发挥的作用,以及化疗对Treg的影响,为CLL的治疗、降低并发症发生率及改善患者预后提供参考。方法:以体检中心32例健康体检者为正常对照组,29例CLL初治患者为病例组,病例组中有15例患者接受化疗,该部分CLL患者作为化疗组化疗前、后互为对照。上述试验对象均使用抗人球蛋白（IgG,C3b/C3d）检测卡对红细胞表面是否存在免疫球蛋白和/补体进行定性检测（直接抗人球蛋白试验,DAT）;采用三色直接免疫荧光素法标记细胞抗原,如CD4、CD25、CD3,多参数流式细胞术检测正常对照组和CLL患者外周血CD4⁺CD25⁺T细胞,以CD3+T细胞设门,Cell Quest Pro软件分析正常对照组和CLL患者外周血CD4⁺CD25⁺T细胞占T细胞比例,以CD4⁺CD25^high作为Treg细胞的标记物;分离血浆,提取外周血单个核细胞（PBMC）,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定PBMC叉状头/翅膀状螺旋转录因子（FoxP3）mRNA的表达水平;用酶联免疫分析-双抗夹心法（ELISA）检测血浆中抗人红细胞抗体IgG浓度,分别比较CLL组与正常对照组、化疗组化疗前和化疗后上述各指标的差异性,并进行相关性研究,探讨CLL患者外周血CD4⁺CD25⁺T细胞数量或比例变化与疾病进展的关系以及化疗前后抗人红细胞抗体IgG浓度与CD4⁺CD25⁺T细胞比例、FoxP3 mRNA表达水平变化的关系。结果:1.CLL病例组患者DAT阳性2例,对照组DAT阳性0例。化疗组DAT阳性5例,其中有3例由化疗前阴性转为阳性。2.CLL病例组患者血浆抗人红细胞抗体IgG浓度、外周血CD4⁺CD25⁺ T细胞比例和PBMC FoxP3 mRNA的表达水平均显著高于正常对照组（P<0.05）;CLL患者化疗前后相比,化疗后患者血浆中抗人红细胞抗体IgG浓度较化疗前显著升高（P<0.05）,但外周血CD4⁺CD25⁺T细胞比例和PBMC FoxP3 mRNA表达水平显著低于化疗前（P<0.01）。3.根据Binet分期,随着CLL病情进展,A期、B期和C期三期患者CD4⁺CD25⁺T细胞占T细胞的比例及外周血单个核细胞FoxP3 mRNA的表达有逐渐升高的趋势,但上述指标在不同分期患者之间的差异性无统计学意义（P>0.05）。4.相关性研究表明,病例组外周血CD4⁺CD25⁺T细胞的比例与PBMC FoxP3 mRNA的表达呈正相关性（r=0.683,P<0.01）;病例组血浆抗人红细胞抗体IgG浓度与外周血CD4⁺CD25⁺T细胞比例及PBMC FoxP3 mRNA的表达均无相关性（P>0.05）;CLL患者化疗后血浆抗人红细胞抗体IgG浓度与外周血CD4⁺CD25⁺T细胞比例（r=-0.529,P=0.043）、PBMC FoxP3 mRNA表达呈负相关性（r=-0.596,P=0.019）。结论:1.调节性T细胞在CLL患者外周血中的比例和数量升高,且随着疾病的进展,其比例和数量有增多的趋势。2.化疗会导致CLL患者外周血中调节性T细胞的数量降低以及比例失调,调节性T细胞的这种变化可能是CLL相关性AIHA的发病机制之一。