论文部分内容阅读
植物激素是植物自身合成的一系列有机小分子化合物，能在低浓度条件下调节植物的生理活动。植物激素在植物的生长、分化、发育以及应对生物与非生物胁迫等方面发挥重要作用。高灵敏、高通量的植物激素分析方法对植物激素研究具有非常重要的意义。目前在植物材料内源激素的定量分析方面，样品前处理方法主要是离线固相萃取，存在操作繁琐、费时，净化效率低，易引入误差，且有机溶剂消耗较大等问题。本文基于在线固相萃取-液相色谱-串联质谱(on-line solidphase extraction-liquid chromatography-tandem mass spectrumetry, on-line SPE-LC-MS/MS)联用技术，开发了针对多种植物激素的分析方法，主要内容如下: 1.建立了对酸性植物激素吲哚-3-乙酸(Indole-3-acetic acid,IAA)、吲哚-3-丙酸(Indole-3-propionic acid,IPA)、吲哚-3-丁酸(Indole-3-butyric acid,IBA)、脱落酸(Abscisic acid,ABA)、水杨酸(Salicylic acid，SA)和茉莉酸(Jasmonic acid，JA)同时定量分析的方法。基于反相作用对样品进行除杂和富集，开发的方法简便、快速、准确，方法学验证结果良好。应用该方法定量分析了水稻幼穗中内源IAA、ABA、SA和JA的含量。该方法分析水稻叶片伤害后多种酸性植物激素含量变化的情况发现，茉莉酸含量显著上升，与文献报道一致。 2.建立了对新型植物激素独角金内酯(Strigolactones，SLs)epi-5DS和人工合成类似物GR24的定量分析方法。方法用乙酸乙酯液液萃取植物根系分泌物后，由在线SPE-LC-MS/MS系统分析。该方法样品前处理操作简便，分析重现性较好，且分析通量高。该方法应用于分析水稻独角金内酯突变体以及野生型的水培液中根分泌的epi-5DS含量，定量分析结果与材料的遗传学背景非常吻合。 3.建立了对细胞分裂素(Cytokinins，CKs)tZR、iP和iPR的定量分析方法。建立的细胞分裂素分析方法具有材料用量较少，操作流程简单和分析速度快等优点。该方法基于亲水亲脂平衡作用对样品进行除杂和富集，应用该方法能够定量分析拟南芥材料中的内源tZR、iP和iPR。