脂肪干细胞膜片复合纳米羟基磷灰石/胶原支架体外成骨分化能力的研究

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目的:患者由于疾病、外伤等原因导致的组织器官受损、功能障碍,组织工程学的发展为创伤修复提供了新的处理方法。本实验通过脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的分化特性入手,将其形成细胞膜片后,与纳米羟基磷灰石/胶原(nano-hydroxyapatite/collagen,nHAC)支架相复合,与单纯接种脂肪干细胞悬液比较黏附能力及体外诱导成骨分化能力。研究方法:1、取健康人吸脂后脂肪,提取ADSCs,并进行体外培养及鉴定。2、制备nHAC支架。3、构建ADSCs细胞膜片并对其进行组织学染色观察,行成骨诱导。4、设置ADSCs悬液与nHAC支架复合组、ADSCs膜片与nHAC支架复合组,测定早期细胞黏附率及成骨能力的表达,扫描电镜下观察结构。结果:1、细胞生长曲线大致呈“S”型,流式表型鉴定CD44、CD105呈阳性表达,CD45呈阴性表达,成骨及成脂诱导结果证实提取的细胞为脂肪干细胞。2、细胞膜片HE染色观察呈复层细胞排列,成骨诱导可见大片ALP染色颗粒。3、在体外实验中,与其他组相比,ADSCs膜片与nHAC支架复合组表现出良好的细胞黏附率,且ALP的表达显著提高,具有统计学差异。结论:将ADSCs诱导为细胞膜片形态,与纳米羟基磷灰石/胶原支架共同培养,细胞膜片在支架上的黏附力相对于细胞悬液在支架上的黏附力更好,成骨活力更高。
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