家蚕（Bombyxmori）是重要的鳞翅目模式昆虫，家蚕基因组测序工作在2003年10月即已完成，并于2008年8月完成家蚕bHLH家族成员的鉴定。家蚕有52个bHLH基因，系统进化树分析把它们分成39个家族，六个组。然而，有关家蚕bHLH基因及其功能的研究报道较少。迄今为止，只有ASCa家族的4个成员和Twist家族、AP4家族、Bmal家族、Trh家族各有1个成员的基因得到克隆，并检测了它们在家蚕不同组织中的表达情况。　　 atonal基因属于bHLH转录因子的Atonal家族，最早于1993年在果蝇中被发现，随后在赤拟谷盗，河豚鱼，鸡，小鼠以及人中相继发现了该基因，然而关于家蚕atonal基因的研究仍报道较少。　　 本文利用生物信息学和实验方法得到了家蚕bHLH转录因子基因atonal，并对其进行了分析和鉴定，为进一步研究atonal的功能积累了一些基础信息资料。实验研究的主要结果如下:　　 1.生物信息学分析表明，家蚕atonal基因全长644bp，包括60bp的5-UTR，170bp的3-UTR，414bp的开放阅读框(ORF)，编码138个氨基酸，预计相对分子质量为15.5kDa。从获得的基因结构来看，该基因在编码区内没有内含子，有转录起始位点和poly(A)加尾信号，编码区内存在一个保守的功能结构域bHLH基序，位于cDNA的No.301-No.459。多序列比对分析发现，Bmatonal的氨基酸序列和其他物种在bHLH基序区有较高保守性。系统发生分析结果表明，家蚕atonal序列与大红斑蝶的atonal序列形成单进化枝。　　 2.根据cDNA序列设计引物扩增出家蚕atonal编码序列，利用pGEX-4T-2表达系统在大肠杆菌BL21中进行了表达，得到了分子量约41.5kDa的融合蛋白，westernblotting鉴定正确。通过割胶对目的蛋白纯化回收后免疫新西兰大白兔，制备抗家蚕Atonal蛋白的血清。　　 3.对家蚕不同发育阶段和组织进行RT-PCR分析，结果表明atonal在家蚕各个发育阶段和幼虫不同组织都有表达，其中神经节及五龄幼虫的表达量相对较高。提取五龄幼虫各组织蛋白进行westernblotting分析，其结果与RT-PCR的分析结果一致即atonal在各组织均有表达。细胞免疫荧光显示家蚕Atonal蛋白主要定位在细胞质中，细胞核膜中少量表达。　　 4.利用家蚕杆状病毒表达系统，在家蚕BmN细胞系中成功过表达了重组的Atonal蛋白，westernblotting鉴定条带与预测大小一致，约为15.5kDa。