许多疾病和创伤都伴随着疼痛存在。据 WTO 的数据显示,全球约有 22%的人正在忍受疼痛的折磨。疼痛,尤其是慢性疼痛和晚期癌痛不仅严重影响了病人的生活质量,而且给家庭和社会带来了沉重的负担。目前对慢性疼痛的治疗方法仍存在诸多不足,而且并未使疼痛得到满意的治疗。细胞移植镇痛解决现有镇痛形式诸多弊端的一种新的方法。但该方法应用于临床必须解决细胞来源短缺和受体的免疫排斥反应两大问题。 目的:采用免疫隔离技术,将同种或异种细胞微囊化包埋,然后移植于生物体内,并观察评价移植后细胞的生物活性及镇痛效果。大量的研究显示肾上腺髓质嗜铬细胞(AMCC)能够分泌产生镇痛作用的物质。牛的肾上腺髓质嗜铬细胞(BCCs)产量大﹑易分离获取,因此成为细胞供体的首选来源。本实验在目前 AMCC 分离纯化工艺基础上,建立一种高产率﹑高纯度﹑低成本的分离纯化 BCCs 的方法,并考察BCCs 等的体外功能活性。选用海藻酸钠和壳聚糖两种容易获得的天然高分子材料,制备出强度佳﹑生物相容性好的海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(ACA)微胶囊,将获得的 BCCs 包埋,考察微囊化的 BCCs 的体外生物活性,并通过对慢性疼痛模型的镇痛实验来评价 ACA 微胶囊的免疫保护作用和 ACA 微囊化 BCC 的镇痛效应 ,以此来评价 ACA 微囊化BCCs 移植镇痛的安全性﹑可行性及有效性。 方法:1﹑采用胶原酶灌注﹑机械分离和 Percoll 非连续密度梯度离心的方法获得 BCCs。2﹑采用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化染色的方