【摘 要】
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革兰氏阳性菌Leifsonia xyli subsp.Cynodotis(Lxc)的天然质粒pCXC100中的一个800bp片段对质粒的稳定性起着关键性作用.研究表明该DNA片段也能提高不同质粒在E.coli中的稳定
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革兰氏阳性菌Leifsonia xyli subsp.Cynodotis(Lxc)的天然质粒pCXC100中的一个800bp片段对质粒的稳定性起着关键性作用.研究表明该DNA片段也能提高不同质粒在E.coli中的稳定性,证明了该DNA片段是一种广谱性质粒稳定因子(broad-range plasmid stabilization fragment,PSF).对该稳定片段进行序列分析,发现正反各有一个开放阅读框,而且此稳定片段与GeneBank中序列无同源性;将PSF克隆到质粒pBC SK(+)中得到pBCSKS.用Northern-blot方法检测该片段在大肠杆菌的转录,有杂交信号检出,但大小比该片段大,此RNA可能是从PSF中的启动子启动到质粒复制子中的终止子终止;用SDS-PAGE方法未检测出特异蛋白带;STE/酚氯仿法测定含有该片段的质粒pBC SKS及空载体pBC SK(+)在大肠杆菌JM109中的拷贝数,未发现拷贝数的有大的变化,说明该片段不是通过改变质粒拷贝数来稳定质粒;另外,质粒pBC SKS与pBC SK(+)一样可形成多聚体,说明该稳定因子不是通过多聚体的解聚机制来稳定质粒;推测该稳定因子与细菌的程序性死亡机制或质粒的分配和定位有关.
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