角膜保存技术增加了角膜移植的有效性。角膜保存的方法包括角膜深低温保存、器官培养、中期保存和湿房保存。目前应用广泛的主要是角膜中期保存和器官培养的方法，器官培养主要在欧洲眼库应用。中期保存的方法操作简单方便，目前国际公认的Optisol-GS液的保存期限长达三周，一般在应用时维持两周内保存。中期保存液的成分包括基础培养液、高分子聚合物、缓冲体系、抗生素以及其它利于维持组织活性的添加成分。高分子聚合物对保存期间角膜活性的维持具有重要作用，而同时含有硫酸软骨素和低分子右旋糖酐是目前角膜中期保存液的最基本类型。结合肝素、透明质酸以及海藻糖的性质和生物活性，本研究主要探讨肝素、透明质酸以及海藻糖对角膜的保护作用，将它们应用于角膜中期保存液，以期能在保存期间较好地维持角膜组织活性，甚至延长角膜保存时间。课题研究内容包括肝素、透明质酸、海藻糖应用于角膜中期保存液的处方研究，含肝素和透明质酸的角膜保存液对离体角膜的保护作用研究以及含肝素和透明质酸的角膜保存液保护角膜作用机制的初步研究三个方面。 1 肝素、透明质酸和海藻糖应用于角膜中期保存液的处方研究 肝素、透明质酸、海藻糖用于兔角膜保存，进行处方单因素试验，每因素设立低中高三个水平，通过角膜内皮细胞茜素红—台盼蓝染色进行保存7天和21天的角膜内皮细胞活性评价。随保存时间的延长，角膜内皮细胞活性率降低。与硫酸软骨素对照组相比，透明质酸和肝素各浓度均显示改善角膜保存的作用。海藻糖作用较肝素和透明质酸的保护作用弱，但仍具有一定活性，且与其应