利用CRISPR/Cas9技术靶向编辑蓖麻RcPLA2基因与遗传转化研究

来源 :内蒙古民族大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:junshan_lmt
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蓖麻(Ricinus communis L.)是一种特殊的油料作物,具有很高的经济价值。单倍体育种可以克服传统育种的缺点为丰富遗传资源提供了可能。以高效、便捷而著称的CRISPR/Cas9基因编辑技术的兴起对改良作物品种发挥了重要作用。随着CRISPR/Cas9技术的发展成熟,运用基因编辑技术对蓖麻基因定点编辑,从而获得性状极优的品种,将成为蓖麻育种的热点。因此,挖掘蓖麻单倍体相关的基因,通过转基因技术获得单倍体蓖麻材料,以及探明单倍体蓖麻形成机理,对于蓖麻育种具有重要的理论与实践意义。  本研究经同源分析确定了与玉米ZmPLA1基因相似性较高的RcPLA2基因。且ZmPLA1与RcPLA2蛋白都具有patatin结构域,推测行使的功能一致。为了研究该基因在蓖麻中的功能是否与单倍体诱导相关,该研究使用蓖麻2129作为研究材料,构建了CRISPR/Cas9-RcPLA2基因敲除载体。同时进行了蓖麻下胚轴再生系统的建立,并通过农杆菌介导法转化蓖麻下胚轴和子叶节受体得到了抗性植株。通过对抗性植株进行转基因验证,最后得到5棵转基因植株。以期为得到单倍体蓖麻植株奠定基础。
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