基于PRMT5ΔHep小鼠模型探究霍山黄大茶保肝功效

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黄茶属六大茶类之一,具独特的闷黄和拉老火工艺,其茶汤与叶底均呈黄色,含丰富的生物碱和多酚类物质,为实现其生理功效提供了物质基础。本课题组前期研究证明黄大茶在降血糖、降血脂、改善糖尿病及代谢综合症方面均具有良好的功效,但未对其保肝机制深入探究。蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)通过对蛋白质的甲基化修饰参与机体多种生物进程,全身性敲除PRMT5小鼠会出现胚胎致死现象;而本课题组培育了肝脏特异性敲除PRMT5小鼠(PRMT5ΔHep),在小鼠青少年期发生肝脏纤维化,最终发展至肝癌病变。本研究首先探析霍山黄大茶的主要化合物成分及红外光谱特征,并与其它茶类比较化学品质差异。再以PRMT5ΔHep小鼠为模型,研究黄大茶干预对PRMT5ΔHep小鼠肝脏功能的影响。主要研究结果如下:1.在检测的7个干茶样中,总多酚含量绿茶最高(28.12±0.08mg/g、24.81±0.29 mg/g),其次是白茶(22.16±0.38mg/g)和黄大茶(20.81±0.04mg/g、16.79±0.43mg/g)。茶多糖含量在黄大茶中(1.93±0.14mg/g、1.99±0.11mg/g)最高。总氨基酸含量在绿茶(17.17±0.05 mg/g、18.81±0.06 mg/g)和白茶(17.07±0.11 mg/g)中较高,在黄大茶(3.05±0.01 mg/g、1.56±0.04 mg/g)中较低,仅高于全发酵的黑茶。儿茶素含量在两种绿茶中最高,黄大茶排其次。生物碱含量在7种茶叶中相对稳定。2.采用近红外光谱法,实现对茶叶及茶汤的有效聚类。采用PLS法构建总茶多酚、茶多糖、可溶性糖及5种茶叶单体的定量模型,其R2值介于0.95-0.71之间,定量分析效果良好。3.繁殖并选取符合基因型的小鼠及其同窝对照鼠共55只,分四组处理,分别是Con(WT)、ConP5(PRMT5ΔHep)、YT(WT+5%黄大茶)、YTP5(PRMT5ΔHep+5%黄大茶)组。每周监测小鼠体重、饮食量和饮水量,分别在处理26周、61周牺牲小鼠,检测小鼠生长性能、肝脏功能及组织形态。4.黄大茶饮食干预26周,与Con组相比,ConP5组和YT组公鼠体重显著降低;与ConP5组相比,YTP5组公母鼠体重显著降低。黄大茶处理增加了 PRMT5ΔHep小鼠饮水量,不影响其能量摄入。ConP5组小鼠肝脏表面粗糙不平整,肝重比与Con相比显著升高,显微观察组织出现裂纹;黄大茶干预后,肝脏表面恢复平滑,肝重显著降低。四组小鼠血清指标TG、TC、AST、ALT均无显著性差异。5.黄大茶饮食干预61周,四组小鼠体重、肝重、肝重比均无显著差异。Con组和YT组小鼠肝脏表面形态正常;ConP5组小鼠肝脏表面出现白色肿块,且在肝叶缘处肿块膨大明显,肿块数量极显著增加;黄大茶处理后,肝脏肿块数量显著降低(37%),显示出了显著抑制肝脏肿瘤形成的作用。综上所述,在七种茶样中,黄大茶茶多糖含量最高,总茶多酚含量低于绿茶和白茶,总氨基酸含量较低,儿茶素和生物碱含量介于发酵茶与非发酵茶之间。对PRMT5ΔHep模型小鼠进行黄大茶干预试验显示,黄大茶显著降低肝脏表面肿块数量,改善肝组织形态,初步证明了黄大茶具有保护肝功能的作用。
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