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一、Aβ 1-42诱导的小鼠学习记忆障碍及其机制 目的： 通过对学习记忆相关行为学的研究，明确Aβ1-42在不同时间点对小鼠学习记忆功能的影响；并通过测定脑内相关蛋白含量，研究其作用是否涉及HPA轴与第二信使通路。 方法： 1. 建立模型：将ICR小鼠随机均分为正常组与模型组，向模型组小鼠侧脑室微量注射Aβ 1-42建立模型。 2.行为学测试：随机将正常组与模型组各细分为五组，分别在Aβ 1-42脑给药后7天、1个月、4个月、8个月和12个月五个时间点进行水迷宫实验和跳台实验。 3. 相关机制研究：分析小鼠双侧肾上腺重与体重比值评价小鼠HPA轴功能状态；采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清皮质酮(CORT)含量；采用酶联免疫印迹法（Western Blot）检测各组海马及前额叶皮层内HPA轴与第二信使通路相关蛋白的含量，包括CRF、GR、pCREB以及BDNF。 结果： 1. 行为学测试： a．Morris水迷宫结果表明小鼠侧脑室Aβ1-42给药后7天，小鼠已经出现学习记忆障碍，这种障碍持续4个月仍然存在，而在第8个月后模型组与正常组差异减弱甚至消失。在Aβ给药后7 D、1 M与4 M三个时间点，经过6个Block的训练，模型组小鼠比正常组小鼠找到平台用时更长；在随后的1 h与24 h平台搜索实验中，通过分析潜伏期与原平台穿越次数，发现模型组与正常组相比，短期与长期空间记忆能力均显著下降。 b．跳台实验表明小鼠侧脑室Aβ 1-42给药后7天，小鼠开始出现对足底电击的记忆障碍，具体表现为潜伏期变短。同水迷宫实验，造模后8个月开始，模型组与正常组显著性差异消失。 2.HPA轴相关指标:小鼠侧脑室Aβ 1-42造模1个月后小鼠肾上腺系数与CORT增大，造模7天开始GR与CRF表达增加。同行为学实验，造模后8个月开始，模型组与正常组显著性差异消失。 3.第二信使通路相关蛋白：小鼠侧脑室Aβ 1-42造模后7天，pCREB/CREB水平下调；造模后1个月BDNF水平下调，而在Aβ给药后8个月开始模型组与正常组差异减弱甚至消失。 结论： Aβ1-42侧脑室给药后7 天，小鼠学习记忆功能出现损伤，并且Aβ的记忆损伤作用至少持续4个月。其机制可能与HPA轴功能失调和第二信使通路相关蛋白CREB磷酸化水平和BDNF表达水平变化密切相关。 二、PDE2抑制剂Bay 60-7550对Aβ诱导的学习记忆障碍的改善作用及机制研究 目的： 通过对学习记忆相关行为学的研究，明确PDE2抑制剂Bay 60-7550对Aβ诱导的小鼠学习记忆功能的改善作用，并通过测定脑内相关蛋白含量，研究其作用机制是否涉及HPA轴与第二信使通路。 方法： 1.建立模型：ICR小鼠侧脑室微量注射Aβ 1-42建立模型。 2. 行为学测试：通过水迷宫实验和跳台实验观察PDE2抑制剂对Aβ1-42诱导的学习记忆损伤的改善作用。 3. 相关机制研究：通过小鼠双侧肾上腺重与体重比值分析小鼠HPA轴功能状态；采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清皮质酮（CORT）含量；采用酶联免疫印迹法（Western Blot）检测各组海马及前额叶内HPA轴与第二信使通路相关蛋白的含量，包括CRF、GR、pCREB和BDNF。 结果： 1. 行为学测试： a．Morris水迷宫结果表明小鼠侧脑室Aβ 1-42给药后小鼠出现学习记忆障碍，潜伏期下降，原平台穿梭次数减少。PDE2抑制剂Bay 60-7550（0.5, 1.0, 3.0 mg/kg, i.p.）能显著改善这种现象，并且这种变化可以被事先给予PKG拮抗剂KT5823所拮抗。 b．跳台实验结果表明小鼠侧脑室Aβ 1-42给药后出现学习记忆障碍，潜伏期上升。PDE2抑制剂Bay 60-7550（0.5, 1.0, 3.0 mg/kg, i.p.）能显著改善这种现象，并且这种变化可以被事先给予PKG拮抗剂KT5823所拮抗。 2.HPA轴各指标:小鼠侧脑室Aβ 1-42造模后肾上腺系数增大，海马与额叶GR与CRF表达增加，HPA轴功能失调。PDE2抑制剂Bay 60-7550（0.5, 1.0, 3.0 mg/kg, i.p.）能显著调节HPA轴功能，给药前30 min使用PKG拮抗剂KT5823预处理减弱Bay 60-7550对HPA轴的影响。 3.第二信使通路相关蛋白：小鼠侧脑室Aβ 1-42造模后海马pCREB/CREB降低，额叶pCREB/CREB和BDNF降低，第二信使通路下调，而Bay 60-755（0.5, 1.0, 3.0 mg/kg,i.p.）给药能够显著激活cGMP-pCREB-BDNF信号通路。 结论： 小鼠Aβ1-42侧脑室给药后学习记忆功能出现损伤，PDE2抑制剂Bay 60-755能够显著改善这种现象，其机制可能与 HPA轴功能失调和第二信使通路相关蛋白表达水平变化密切相关。